川贝母培养物快速生产中的有效除菌研究.pdfVIP

川贝母培养物快速生产中的有效除菌研究.pdf

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第32耄第翔 成都大学学报(自然科学版) V.01.32No.3 of jcieice 2013年9月 Journalchengduuniversity(Natu王ilEdition) Sep.2013 文章编号:1004—5422(2013)03一0229一03 川贝母培养物快速生产中的有效除茵研究 涛1 王跃华1,张 珏1,江明殊1”,郭翠平1,何诗红1,王晓蓉3,刘 (1.成都大学生物产业学院,四川成都610106;2.四川师范大学生命科学学院,四川成都610101; 3.成都恩威集团(投资)有限公司,四川成都610041) 摘要:在Ms培养基中分别添加不同浓度的头孢噻肟钠对染茵川贝母组培物进行抗生素除茵培养,分析头孢 噻肟钠对染茵川贝母组培物的除茵效果.实验表明,采用浓度为500 IIlg·L。1的头孢噻肟钠抗生素培养基连续进 行2次除茵处理培养,对染茵的川贝母组培材料的除茵效果最好,其除茵率高达96.3%. 关键词:川贝母;头孢噻肟钠;除茵 中图分类号:陀82.6 文献标志码:A 至45℃左右时在超净工作台上分别添加经细菌过 O 引 言 滤器过滤后的头孢噻肟钠母液,配制成浓度为300、 在利用组织培养技术快速生产药用植物有效成 400、500、600和700mg·L一的抗生素培养基,并以不 分时,经常会出现少量组培材料染菌的情况.目前, 加头孢噻肟钠的培养基为对照组CK. 解决该问题的主要方法,一般是将染菌的材料取出 1.2.2染茵川贝母组培材料的清洗. 后,用酒精和升汞对材料进行重新消毒处理.但由于 在超净工作台上将染菌川贝母组培材料从培养 组织培养的材料,其细胞都比较幼嫩,且长期生活在 瓶中取出,切除生长不好的部分,用无菌水冲洗2~ 人工培育的环境条件下,培养细胞抵御各种消毒液 5次后,用无菌滤纸反复吸干材料表面的水分,再放 的能力大大降低,当用酒精和升汞消毒处理组织培 入含300mg·L。1头孢噻肟钠的抗生素水溶液中浸泡 养材料后,常造成培养材料的大量受损,致使其严重 10min,其间不停振荡,取出后再用无菌滤纸反复吸 褐化和死亡.针对本实验室在川贝母培养物快速生 干材料表面的水分. 产过程中出现的染菌问题,本研究通过选择适宜的 1.2.3染茵川贝母组培材料的预除菌处理. 抗生素浓度和除菌时间,以探讨其利用抗生素培养 将经清洗处理后的材料接人头孢噻肟钠浓度为 300 2.0 0.3 基进行有效除菌的可行性. lTlg·L-I的硒+6一BAnlg·L“+NAAmg· L‘1+蔗糖30g·L。液体培养基中进行预除菌处理7 1材料与方法 d.其间摇床转速120r/Inin,培养条件为每天光照lo 200 1.1材料 h,光照强度为l lux,温度20℃(以下各项培养 实验所用的材料包括:已感染细菌的川贝母组 条件相同).

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