家蚕肠道纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化研究.pdfVIP

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2017-09-14 发布于湖北
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家蚕肠道纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化研究.pdf

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基因组学与应用生物学，2013 年，第32卷，第2 期，第177-184页 GenomicsandAppliedBiology,2013,Vol.32,No.2,177-184 研究报告 ResearchReport 家蚕肠道纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化研究 1 1,2 1 1 1,2* 马如箭贾俊强刘艳伟任子旭桂仲争 1江苏科技大学,镇江,212003;2 中国农业科学院蚕业研究所,镇江,212018 *通讯作者,srizzgui@ 摘要从5龄家蚕肠道分离筛选得到一株产纤维素酶菌株BMC-2，以羧甲基纤维素酶(CMCase)比活力为响应值，通过Plackett-Burman 试验设计、最陡爬坡试验和Box-Behnken 试验设计对菌株BMC-2 产纤维素酶发酵条件进行优化，结果表明，发酵时间、发酵温度、培养基初始pH 和转速对CMCase 比活力具有显著影响，其影响程度由大到小依次为发酵时间、培养基初始pH、发酵温度、转速。确定菌株BMC-2产纤维素酶最优发酵条件为：发酵时间94.35h，发酵温度30.3℃，培养基初始pH7.01，转速 179r/min。在此条件下， CMCase 比活力理论值为25.801U/mg，验证值为25.526U/mg，较产酶条件优化前提高了1倍，预测模型可靠性高，可应用于菌株BMC-2 产纤维素酶条件的优化。关键词家蚕,纤维素酶, 响应面法,最优发酵条件 ScreeningofaCellulase-producingStrainfromtheLarvalGutof Bombyx mori andOptimumtheFermentationCondition 1 1,2 1 1 1,2* MaRujian JiaJunqiang LiuYanwei RenZixu GuiZhongzheng 1JiangsuUniversityofScienceandTechnology,Zhenjiang,212003;2SericulturalResearch Institute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences, Zhenjiang,212018 *Correspondingauthor,srizzgui@ DOI:10.3969/gab.032.000177 Abstract Anovelcellulase-producingfungusnamedBMC-2wasisolatedfromthefifth-instarlarvalgutofBom- byxmori.Fermentationconditionsforthecellulase-producing,inwhichCMCasespecificactivitywastakenasre- sponsevalue,wereoptimizedwithPlackett-Burmandesign,steepestascenttestandBox-Benhkendesign.There- sultsshowedthatfermentationtime,fermentationtemperature,initialpHofmediumandrotationalspeedhadinflu- enceoncellulase-producingsignificantly.Theaffectingorderwasfermentationtime,initialpHofmedium,fermen- tationtemperatureandrotationalspeed,inturn.Theoptimizedfermentationconditionswereasfollows:fermenta- tiontime94.35h,fermentationtemperature30.3℃,initialpHofmedium7.01androtationalspeed179r/min.Under theoptimalconditions,theCMCasespecificactivitywas25.801U/mgintheoryand25.526U/mginactualvaluethat wasincreasedby1timescomparedwiththeinitialfermentationcondition.Theresultindic