C57BL／6J亚系Nnt部分功能基因丢失的检测.pdfVIP

218 实验动物与比较医学 LaboratoryAnimalandComparativeMedicine doi：10．3969~．issn．1674-5817．2011．03．014 C57BL／6J亚系Nnt部分功能基因丢失的检测 刘吉宏，周 艳，王建飞 (葛兰素史克(上海)医药研发有限公司，上海201203) [摘要] 目的 介绍一种判定C57BL／6小鼠亚系中烟酰胺核苷酸转氢酶(Nnt)基因是否丢失的PCR 检测方法。方法 用PCR方法分别对5只购 自杰克逊的C57BL／6J小鼠以及 10只本公司C57BL／6 背景的转基因小鼠基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行分析。结果 从杰克逊实验室购得的5 只C57BIJ6J小鼠基因组以及本公司抽取的3只C57BL／6小鼠Nnt部分功能基因丢失，本公司C57BL／6 中有6只小鼠含有Nnt基因未丢失，另外还有1只小鼠为Nnt基因杂合小鼠。结论在选择C57BL／6作 为代谢性实验的模型时，应考虑选择适当的亚系。 [关键词]C57BL／6；亚系；遗传背景；烟酰胺核苷酸转氢酶；PCR [中图分类号】Q95—331 文【献标识码】B [文章编号】1674—5817(2011)03．0218．02 C57BL／6小 鼠起源于C57BL品系，是 目前较为 小鼠5只，再从本公司转基冈小鼠中随机抽取4周龄 人们所熟知的品系之一，且已被作为研究的基础品 雄性C57BL／6背景小鼠10只，分别编号为 1～l5。 系以及建立 自发或诱导性突变小鼠的背景品系。目 1．2 实验仪器和试剂 前至少已有9种C57BL／6的亚系 ”【。在这些亚系中， PCR仪型号：5331，购 自德国艾本德股份公司 杰克逊实验室的C57BL／6J和美国国立卫生院的 (Eppendorf)；电泳仪型号：PowerPacUniversal，购 自 C57BL／6N是C57BL／6的两个核心亚系2【1。 伯乐生命医学产品(上海)有限公司(BIO．RAD)；凝胶 目前，国外大多采用单核苷酸多态性(SNPs)方 成像系统型号：FR．980，购 自上海复 日科技有限公 法来鉴定近交系小鼠的遗传背景 【。在MGI．Mouse 司。 DNAMarker购 自北京全式金生物技术有限公 Strains，SNPs Polymorphisms数据库、MPD． 司：基因组DNA提取试剂盒DNeasyBlood＆Tissue MouseSNPs数据库 以及杰克逊小鼠数据库上都公布 Kit购 自凯杰生物技术(上海)有限公~(Qiagen)；2× 了一些用于区别C57BL／6 系的SNPs。本文介绍 TaqPCRMasterMix购 自天根生化科技(北京)有限公 一 种常规 PCR方法，用于鉴定Nnt功能基 冈在 司；引物由英杰生命科技有限公司fInvitrogen)合成。 C57BL／6J亚系中的缺失，以便于在遗传背景上分 1．3 基因组DNA的提取 辨 C57BL／6的亚系，尤其是J或