不同方法检测O型口蹄疫免疫抗体的对比试验.pdfVIP

黑《龙江畜牧兽医》综合指导版 ·医 ·柚 · 口蹄疫 (foot一；and—mouthdisease，FMD)是由口蹄 抗体合格。 疫病毒 (foot—and一]mouthdiseasevirus，FMDV)引起 的 2 结 果 一 种急性热性高接触性传染病，我国对其实行强制 经 IHA方法检测，牛、羊、猪 O型 口蹄疫免疫抗 免疫 ，其免疫抗体效价检测是科学评价免疫质量的 体合格率分别为 81．90％(86／105)、83．67％(82／98)、 有效手段，也是制定免疫程序的可靠依据，但在实际 71．57％(73／102)，总合格率为 79．02％(241／305)， 工作中，常因抗体检测方法不同而使检测结果有差 LPB—ELISA方法检测牛、羊、猪O型 口蹄疫免疫抗体 异，同一份样品采用不同的方法检测结果不一致的 合格率分别为80％(84／105)、80．61％(79／98)、71．57％ 现象时有发生，因此选择科学合理的检测方法是进 (73／102)，总合格率为 77．38％(236／305)，双合格(两 行科学评估的基础 。笔者采用正向间接血凝试验 种方法检测均合格)率为76．07％(232／305o详见表1。 (IHA)和液相阻断ELISA(LPB—ELISA)这两种常用 的检测方法对 305份家畜血清样品进行了0型 口蹄 表 1 正向间接血凝试验 (IHA)与液相阻断ELISA 疫免疫抗体平行x,It：L检测试验。 (LPB—ELISA)检测 0型 口蹄疫免疫抗体结果 1 材料与方法 1．1 被检血清 随机采取进行了牛羊0型 一亚洲 I口蹄疫双价 灭活苗免疫后第2，1天左右的牛血液样品 105份、羊 血液样品各98份 ，进行了猪 口蹄疫0型灭活疫苗免 疫后第 21天左右的猪血液样品 102份，分离血清， 置4~C冰箱保存待检。 1．2 诊断试剂 口蹄疫 0型正向血凝抗原、阳性血清、阴性血 两种方法的符合率：用 IHA和LPB—ELISA两种 清、稀释液，由中国农科院兰州兽医研究所生产 ，批 方法检测的305份样品中共有 292份样品的结果一 号为0型口蹄疫液相阻断ELISA检测试 致，总符合率为95．74％。 剂盒 ，由中国农科院兰州兽医研究所生产，批号为 3 分析与讨论 检测结果显示，IHA和 LPB—ELISA两种检测方 1．3 检 测方法及结果判定 法的结果基本符合 (95．74％)，检测同批血清的抗体 正向间接血凝试验 (IHA)严格按试剂盒说明书 效价有着明显的对应关系，两种检测方法均有较高 进行操作，其抗体效价≥1：32判定为抗体合格。O 的敏感性和特异性，且试验结果可靠。 型 口蹄疫液相阻断 ELISA(LPB—ELISA)严格按试剂 (1)检测结果中IHA方法 比LPB—ELISA方法检 盒说明书进行操作。以病毒抗原对照平均 OD值的 测样品的免疫抗体合格率略高，可能与 IHA方法的 50％为临界值，被检血清OD值大于临界值的孔为阴 结果使用肉眼判定 ，存在一定主观性有关。 性孑L，小于临界值的孑L为阳性孔，阳性孔的最高稀释 (2)正向间接血凝试验虽具有使用仪器设备少 、 度为该血清的抗体效价，其抗体效价≥1：64判定为 操作简便快速、抗原价格较低等优点，但在结果判定 上 ：一定的主观性，实验员的判断力不一样 ，就很 有 i出现不同的结果 ，即便对于同一操作者，每次 收稿 日期：2011-05—29