超高效液相色谱法（UPLC）快速测定茶饮料中的咖啡因.pdfVIP

超高效液相色谱法 (UPLC)快速测定茶饮料中的咖啡因 王 峰 (西安产品质量监督检验院，陕西 西安，710068) 摘 要 建立 了超高效液相色谱法(UPLC)测定茶饮料 中咖啡因的含量 。采用 CAPCELLPAKMGⅡ一C，色谱 柱 ，UPLC方法进行测定。流动相为 (乙腈)：V(水)=10：90，流速为 0．5mL／min，检测波长为 273nm，柱温为 30％。结果 在 0～120~g／mL内各组分峰面积与相应浓度呈 良好 的线性关系，R0．99947，加标 回收率在 89％ 一 100％之间，方法精密度相对标准偏差小于 10％。 关键词 超高效液相色谱 ，咖啡因，精密度 ，线性范围 咖啡 因(caffeine)化学名是 1，3，7一三 甲基黄 嘌 乙腈 、甲醇 (色谱纯 ，美 国)；咖啡因标准品(购于 呤或3，7一二氢一1，3，7三甲基一1H一嘌呤一2，6一二酮。咖 Sigma公司)；实验用水均为超纯水。 啡因是从茶叶、咖啡果 中提炼出来的一种生物碱 ，适 市售绿茶、冰绿茶 、冰红茶 、茉莉蜜茶、茉莉清茶 度地使用有祛除疲劳、兴奋神经 的作用。但是 ，大剂 等5种茶饮料。 量或长期使用对人体有强烈的兴奋作用，也会对人体 1．2 试验方法 造成损害 ，特别是它具有成瘾性 ，一旦停用会 出现精 1．2．1 绿茶茶饮料供试品溶液的处理 神萎顿、浑身 困乏疲软等各种戒 断症状…。茶饮料 把绿茶茶饮料原液用纯水按体积 比 1：10稀释， 中都含有一定量的咖啡因，对于检测茶饮料中咖啡因 经0．45 m滤膜过滤后 ，待测 。 含量的方法主要有 GB／T5009．139—2003的高效液 1．2．2 标准溶液 的配制 相色谱法和 《出 口饮料 中维生素 c和咖啡 因检验方 准确称取咖啡 因标准 品，甲醇溶解 ，配制浓度 法 SN／T0744—1999》等方法。 400p~g／mL的标准品溶液 。 超 高效液相色谱 (ultraperformanceliquidchro— 1．2．3 色谱条件的确定 matography，UPLC)是分离科学 中的一个全新类别 ， 分别在前期工作 的基础上选用 CAPCELLPAK MGlI．C，色谱柱 ，以不同的流速、流动相配 比和柱温 是以 1．7m的超细色谱柱填料为核心技术 的新型色 作为参考因素，形成 5个实验组 ，采用同一个绿茶饮 谱分离分析技术 ，增加 了分析的通量、灵敏度及色谱 料进样 ，进行色谱条件优化 ，最终确定测定咖啡因的 峰容量 ，可以极大 的提高分离效率和分析速度 。。 最佳色谱条件 。 本文采用超高效液相色谱 的方法测定咖啡因，建立了 表 1 色谱条件 的优化选择 采用超高效液相色谱法测定茶饮料 中咖啡因的方法 ， 试验表明该方法前处理简单 ，分离效能好 ，回收率高 ， 可以快速 、简便 、准确检测茶饮料中的咖啡因，得到准 确的检测结果 。 1 仪器 与方法 1．1 仪器与试剂 1．2．4 咖啡 因标准曲线的建立 超高效液相色谱 (AQUITYUPLCWATERS沃特 精密吸取 400p~g／mL的标准储备液 ，用纯水逐 世 中国有限公司)，超纯水制备系统 (Milli—Q密理博 级稀释为 120、80、40、20和 10~g／mL的标准系列溶 液