β2肾上腺素能受体基因多态性与原发性高血压的关系.pdfVIP

江苏医药 年月第 卷第期 , , , .】 论 著 肾上腺素能受体基因多态性与原发性 高血压的关系 朱 敏 门琛 李 健 盛海辉 占伊扬 【摘要】 目的 探讨。肾上腺素能受体基因 ? 和多态性与中国汉族人群原 发性高血压 发病风险的关系。方法 江苏偏远农村地区 例 患者 组和 名血压 正常者 组为研究对象,用基因芯片技术检测一 基因位点的基因型,比较两组基因型和等位 基因分布频率的差异。结果 和 多态性的基因型、等位基因频率、和 多态 性构成的各单倍型分布频率,两组间差异均无统计学意义 .,携带不同单倍型人群的 发 病风险差异亦无统计学意义. 。结论 一 基因和多态性可能与我国汉族 人群 发病风险不相关。 【关键词】 。肾上腺素能受体基因;原发性高血压;单核苷酸多态性 【中图分类号 【文献标识码】【文章编号? ? ?, , , , . ,, , , 一 . , . 一. . . 一 .; ;,, : . . 原发性高血压 是基因与环境共同作用的 界卫生组织和国际高血压联盟 /高血 多基因遗传疾病,而 的发病机制至今未被阐述 压诊断标准:收缩压≥和或 舒张压≥ 清楚。』 肾上腺素能受体 在很多组织中表;经病史、临床症状、体征及辅助检查排除 达,如心脏、脂肪以及支气管和血管平滑肌。该受体 继发性高血压。选择年龄、性别匹配的正常对照 名,无 家族史。要求所有参与者均为汉族,并排 可与儿茶酚胺类物质结合,产生血管舒张和平滑肌 松弛的效应,推测与 相关的细胞功能持续下 除肝、肾慢性疾病、糖尿病和严重心脑血管疾病。 二、方法 降和血管舒张功能的减弱可能导致血压升高。本研 究旨在探讨? 基因 和 多态性与我 .提取与引物设计 采集外周静脉血 国汉族人群 发病风险的关系。 ,加入 . 抗凝,采用, . . 提人外周血中 资料与方法 一 一 、 基因组 溶于 缓冲液中,置一 ℃保存。 般资料 应用 :∥. . . . / 选自江苏省东台市农村地区, 患者 例,未经药物治疗。高血压的诊断参照 年世 ? / /. 软件进行引物设计,并 对所设计引物进行 以确保序列特异 基金项目:江苏省高校“青蓝工程”项目 性,并排除引物序列中的多态位点,以免影响扩增效 作者单位: 南京理工大学医院内科 朱 敏 ;南京医科 率。表 . 大学第一附属医院老年医学科 门琛、占伊扬 ;东台市人民医院内 科李 健 ;生物芯片上海国家研究中心 盛海辉 责任作者:占伊扬: .年月第 卷第 期,?? 表 引物序列 软件进行数据处理。两组间临床指标的比较用检验,基因型及基因频率比较用 。检验, 引物 序列 一 长度 并采用单倍型分析和多因素回归分析。所 有数据用均数±标准差 ± 表示。. 为差 异有统计学意义。 表 探针序列 :正向引物 :反向 物 探针 序列 一.目的基因扩增 多重的总反应体系: 【二: 口一 一 ,包括 ./ 的脱氧核糖核苷酸 , 、 :’ / 的三羟甲基甘氨酸一氯化钾 一 口一 : . , / , . /; 一 , ./ ,/ 的引物, 一; 的和. × 聚合酶? 结 果., 。多重反应条 一 、 两组临床资料比较 件: ℃ 预变性; ℃变性 , ℃复性组身高、腰围、臀围、、均高于对照, ℃延伸 ,共 个循环; ℃延长。 组 . ,表 。 扩增后,取 反应产物采用 . 琼脂 糖凝胶电泳检测扩增结果。 表 两组一般临床资料 .基因型检测 采用单核苷酸多态性, 芯片技术检测 一 基因型。扩增成功的反应产物用 , ..纯化,纯化后的产物用?, . /片段化,片 段化的酶切产物用脱氧核苷酸末端转移酶 ? , 进行荧光素标记。 每个各设计两条等位基因特异性探针 和 一 条错配探针。芯片用 点 样仪 , , ., 制备, 经杂交洗涤后,芯片用 共聚焦激光 扫描仪 , 进行扫描,利用 , 提取得到每 条探针的荧光信号强度值。基因型通过计算每个 的等位基因分数,判读, 与对照组比较,. . 按照下列公式获得:等位基因 / 等位基因二、两组 基因型及等位基因频率比较 等位基因 。. 表示等位基因 纯合子, . 多态基因型、等位基因频率,两组间差 .%. 为杂合子 , ≥ . 为等位基 异均无统计学意义 . ,表 。 因 纯合子。将荧光信号较弱的位点或 判读所 得的杂合子结果,用或直接测序法验 表基因多态基因型和等位基因频率 % 证。或测序结果与芯片结果一致。所有的 均成功分型。表 三、统计学处理 用 . .