蛋白质溶胶一凝胶包埋法分子印迹复合膜的制备及渗透机理研究.pdfVIP

维普资讯 Vo1．29 高 等 学校 化 学 学 报 No．3 2008年 3月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 498～504 蛋 白质溶胶一凝胶包埋法分子印迹 复合膜的制备及渗透机理研究 张 茉 ，何锡文 ，秦 磊 ，李文友 ，陈朗星 ，张玉奎 ， (1．南开大学化学系，天津300071；2．中国科学院大连化学物理研究所 ， 国家色谱研究分析中心，大连 116011) 摘要 分别以牛血红蛋白、牛血清白蛋白和溶菌酶 3种蛋 白质为模板分子，采用表面涂布的方法制备了在 Nylon微孔滤膜表面覆盖有聚丙烯酰胺凝胶层的分子印迹复合膜，并用扫描 电镜对制备的分子印迹膜的表面 形态和孔结构进行了表征 ，发现支撑膜的表面及内部微孔表面均被一层丙烯酰胺凝胶所覆盖．对用不同蛋 白为模板制备的分子印迹膜进行了这3种蛋白的单一组分和双组分混合溶液渗透实验．结果表明，各蛋 白 底物在印迹膜上的渗透规律是特异性的识别位点和尺寸效应共同作用的结果．特异性识别位点会选择性地 识别模板分子，从而使其渗透速度减慢；尺寸效应主要体现在底物蛋 白的体积越小其渗透越快． 关键词 分子印迹聚合物复合膜；膜渗透机理；蛋 白质分子印迹；膜分离 中图分类号 0657．32 文献标识码 A 文章编号 0251-0790(2008)03-0498-07 分子印迹技术(Molecularlyimprintedtechnique，MIT)是从仿生角度 ，采用人工方法制备对特定分 子(模板分子)具有专一性结合作用和特定空间结构空穴的聚合物——～分子印迹聚合物(Molecularim- printedpolymer，MIP)的技术．材料科学和分离技术两大领域的研究发展大大推动 了MIT的发展．由于 MIP具有构象预定性、特异识别性、长期稳定性及实施简便性等优点，在生物大分子的富集、手性化 合物的分离、固相萃取及敏感膜传感器等诸多领域具有重要的应用前景 ． 分子印迹膜(Molecularlyimprintedmembrane，MIM)是一种兼具分子印迹技术与膜分离技术优点的 新兴技术，近年来 已成为分子印迹技术领域研究的热点之一．目前的商品膜如超滤、微滤及反渗透膜 等都无法实现单个物质的选择性分离，而MIM为将特定 目标分子从其结构类似物的混合物 中分离出 来提供了可行有效的解决途径． 分子印迹膜 的研究开始于20世纪90年代 ，最初将MIT应用于膜分离的物质主要是氨基酸及其 衍生物 、肽 、除草剂和药物等小分子 ．近几年来才开始有以生物大分子为模板制备 MIM 的报 道 ¨]2i．Nishino等 采用抗原决定基法制备了可以选择性识别细胞色素 c、乙醇脱氢酶和牛血清白 蛋白聚丙烯酰胺 自支撑膜．Silvestri等 采用聚合物溶液相转化法，合成了 一淀粉酶的聚丙烯．CO．乙烯 醇印迹膜，通过实验发现，被固定在聚合物上的模板仍具有酶活性，在吸附实验中该膜对模板蛋 白也 有较好的选择性．Zhang争 他。结合溶胶．凝胶和 自组装技术，以人血清蛋白为模板，制备了金电极表面 修饰有巯基 乙酸的石英压电传感器．但到目前为止，还没有关于对MIM 的选择性渗透规律的讨论的研 究报道．作为对药物小分子印迹膜渗透规律讨论的延伸 ”，本文对蛋白质生物大分子印迹膜的选择渗 透规律进行了系统的讨论，所得结果对合理设计及合成可用于选择性分离蛋白质的分子印迹膜有一定 的理论指导意义． 收稿 日期：2007-07-03． 基金项 目：国家 “几七三”计划(批准号：2007CB914101)、国家 自然科学基金 (批准号和天津市 自然科学基金 (批准号 06YFJMJC02800，07JCYBJC00500)资助． 联系人简介 ：李文友，男，博士，教授 ，从事分子印迹和分子识别研究．E-mail：wyli@nankai．edu．ell 张玉奎，男，博士，研究员，博士生导