囊胚注射大鼠多能干细胞在小鼠体内产生大鼠胰腺.pdfVIP

中华细胞与干细胞杂志(电子~．)2013年2月第3卷第1期ChinJCellStemCell(Ele~ aicEdition)，Feb2013,Vo1．3，No． 47 ’ · 研 究 进 展 · 囊胚注射大鼠多能干细胞在小鼠体内产生大鼠胰腺 KobayashiT论著 路君 编译 利用患者 自身的多能干细胞、突破器官形成 自身细胞及外源EGFP．miPSC或mESC共同分化 障碍、体外构建完整的器官是再生医学研究领域 而来，与嵌合体动物身体其他各器官一致。嵌合的 的最终 目标。随着诱导 多潜 能干细胞(induced Pdx-／。小鼠胰腺形状和组织学检测均正常，胰腺细胞 pluripotentstemcell，iPSC)技术的发展，人们 已经 (外分泌、内分泌和导管上皮细胞)皆来源于EGFP． 可 以获得患者的 iPSC。虽然体细胞重编程还存在 miPSC或mESC，但胰腺 中的血管、神经和成纤维 潜在分险，但真正的挑战是建立一种器官形成的方 细胞则由自体及外源细胞共同发育而来。Pdxl嵌 法。体外实现器官再造相当复杂，囊胚互补技术是 合小鼠可存活至成年，GTT实验结果表明Pdxl嵌 实现这一 目标的方法之一。囊胚互补最早由Chen 合小鼠胰岛素分泌在高血糖时增加，血糖和正常小 等报道，他们的研究证明Ra -，-小鼠在囊胚期将野 鼠类似。STZ诱导C57BL／6小鼠发生糖尿病，从表 生型小 鼠胚胎干细胞(mouseembryonicstemcell， 达EGFP的miPSC来源胰腺中分离的胰岛移植在 mESC)注射到内细胞团，发育出表型正常的小鼠。 糖尿病小鼠肾包膜下。2个月后依然可以在移植处 Rag2基因敲除引起小鼠胚胎发育过程中T、B淋巴 检测到表达EGFP的miPSC来源的胰 岛细胞。移 细胞系缺失，小鼠体 内T、B淋巴细胞完全 由野生型 植后的糖尿病小鼠血糖能够恢复正常，葡萄糖耐量 mESC发育而来。Nakauchi研究小组认为，可以在 (glucosetolerancetesting，GTT)实验结果与正常小 基因敲除而造成器官发育缺失的模型动物中复制这 鼠相似。这部分研究结果表明，发育过程中某个器 一 现象，因此他们关注到胰腺及胰腺发育相关转录 官缺失能营造出一个微环境(Pdxl--／小鼠和胰腺缺 因子Pdxl。胰腺和十二脂肠同型盒基因(pancreatic 失微环境)。PSC来源细胞可以代偿的占据这个微 andduodenalhomeoboxl，Pdx1)在胰腺发育和 B 环境，形成一个几乎由供方PSC发育而来的器官。 细胞分化 中发挥重要作用 。Pdxl基因敲 除小 鼠 研究的第二个 目标是得到小 鼠和大 鼠的种间 出生后因胰腺缺失死亡。Nakauchi研究小组假设 嵌合体。将EGFP标记的GT3．2miPSC注射到大 Pclxl--／小 鼠发育过程 中因没有胰腺器官而营造 了 鼠囊胚，或将EGFP标记的大鼠iPSC (riPSC)注射 一 个 “发育微环境 ”，注射多潜能干细胞(pluripotent 到小鼠囊胚，注射的小鼠或大鼠iPSC能够参与异 stemcell，PSC)可形成完全 由PSC来源 的、功能正 基因动物的胚胎发育并产生种间嵌合体动物。嵌合 常的胰腺。他们共设计了3组实验证明这种囊胚互 的PSC分布在全身各器官，且具有正常功能。种间 补性。 嵌合动物中异基因来源细胞 比例明显低于种 内嵌 研究的第一个 目标是在Pdxl基因敲除小鼠中 合，大鼠或小鼠嵌合体的检测结果均一致。大鼠母 获得小 鼠PSC (mPSC)来源 的胰腺。用于注射囊 亲生育的嵌合体动物形态与新生大 鼠相似 ，而 由小 胚的细胞有mESC和 GT3．2小 鼠iPSC。通过显微 鼠母亲生育的则形态类似于正常的新生小 鼠。异源 注射将 GT3．2miPSCs注入Pd