咖啡酸苯乙酯靶向调控人结肠癌HT-29细胞FAK-ERK信号通路的研究.pdfVIP

军事医学 2011年 l2月第35卷第 12期 MilMedSci，Vol35，No12，Dec，2011 咖啡酸苯乙酯靶向调控人结肠癌liT-29细胞FAK．ERK信号通路的 研究 梁路 昌 ，唐志晗 ，李珍发 ，万 剑 ，薛 文 ，王 军 ，涂 宏 ，何 葵 [摘要] 目的 探讨咖啡酸苯乙酯(caffeicacidphenethylester，CAPE)对结肠癌HT-29细胞 FAK．ERK信号转导通 路中相关蛋白表达的作用，寻找其作用靶点，试图阐明CAPE抗肿瘤作用的分子机制。方法 用不同浓度CAPE处 理HT-29细胞，利用Hoechst33258染色法和流式细胞术，检测细胞凋亡的发生。应用Western印迹法分析不同浓度 CAPE对HT一29细胞 中黏着斑激酶(focaladhesionkinase，FAK)和细胞外信号调节激酶(extracellularsigna1．regulated kinase，ERK)蛋白表达的影响。结果 Hoeehst33258染色发现 CAPE作用后凋亡细胞数量增加。流式细胞仪细胞 凋亡率分析显示，0，2．5，5．0，7．5和 10 g／m1处理 HT-29细胞24h后，细胞凋亡率上升，呈剂量依赖性。Western 印迹结果显示，在0—10 ml范围内不同浓度CAPE作用于HT一29细胞24h后，FAK、ERK蛋白表达随CAPE浓 度的增加而下调。结论 CAPE可诱导人结肠癌 HT-29细胞凋亡，其作用机制可能与CAPE抑制FAK—ERK信号转 导通路的激活有关。 [关键词] 咖啡酸苯乙酯；结肠肿瘤；结肠癌细胞 HT一29；细胞凋亡；黏着斑蛋白酪氨酸激酶类；细胞外信号调节 MAP激酶类；免疫蛋 白印迹；抗氧化剂；细胞增殖 [中图分类号] R979．1；R735．3 [文献标志码] A [文章编号】 1674．9960(2011)12-0905-04 CaffeicacidphenethylesterinducesapoptosisofcoloncancercellsHT-29byinhibi- tingFAK ／ERK signaltransductionpathway HANGLu—chang ，TANGZhi—han，LIZhen-fa，WANJian，XUEWen，WANGJun，TUHong ， HE Kui (1．NanhuaUniversity，Hengyang，Hunan421001，China；2．CentralHospitalofHengyang，Hengyang，Hunan421001， China) }Correspondingauthor．E—mail：hekui@medmail．coin．an [Abstract] Objective Toexploretheeffectofcaffeicacidphenethylester(CAPE)ontheexpressionofrelatedpro— teinsinfocaladhesionkinase(FAK)一extracellularsignal—reuglatedkinase(ERK)singaltransductionpathwayincolon cancercelllineHT-29．tofindthetargetsandtoelucidatetheanti．tumormechanism ofCAPE．Methods Thecellsofhu． mancoloncancercelllineHT一29weretreatedwithCAPEatdifferentconcentrations．F1ow cytometryfFCM)andHo． echst33258stainingwereusedtodetectapoptosis．Western—blotnaalysiswasusedtoevaluatetheproteinlevelofFAK—ERK inHT一29cellstreatedbyCAPE．Results Hoeehst33258stainingshowedthatapoptosiscellsincreasedafterthetreatment 0fCAPE．TheresultsofFCM na alysi