高效液相色谱用化学发光检测器测定条件的优化.pdfVIP

研究简报 高效液相色谱用化学发光检测器测定条件的优化 谢光华 刘丽华 （中国科学院化学研究所，北京） 近几年开发的高效液相色谱用化学发光 文以咔唑蚶类化合物为试样，对影响化发 ⒐光 检测器[1-3]是一个很有发展前途的高灵敏度 测定稳定性和灵敏度诸因素作了优化选择， 检测器，它是通过双(2,6)三氯苯基草酸酯 结果找到了检测器稳定工作的最佳条件。 T（CPO）与过氧化氢作用，激发荧光体而发 实 验 部 分 光。前文[4]报道了应用这种检测器测定儿 茶酚胺已获满意的结果，其检出限量比荧光 日立635高效液相色谱仪，昭和电工XT 检测器至少低一个数量级。化学发光反应的 -1化学发光检测器 系（和本所合作开发），内 噪音来自输液泵的脉动、光电倍增管的暗电 径4 150mm，RP-18(E.Merck)，5m自装 流等[5]，其发光值同反应物的浓度、比 色谱柱，TCPO （日本东京化成），过氧化 例、反应介质和混合管长度等因素有关。本 氢、乙腈、甲醇、乙酸乙酯、四氢呋喃和 丙酮均为北京化工厂二级试剂。咔唑类化合 结 果 和 讨 论 物由本所合成，使用前精制。系统流程如图 1，TCPO和H2O2溶液由泵分别送入系统 醚类和酯类可作TCPO的溶剂，但醚类 中混合，并与柱流出液在120三通处会合， 容易生成过氧化物使TCPO分解，故用乙酸 发生反应，直接由化学发光检测器检测，阻 乙酯较合适[6]。我们比较了怂四种有机溶剂对 尼器是为了减小输液脉动。 TCPO的溶解度，顺序为：四氢呋喃＞丙酮＞ 上（接214页） (1980). [44]M.A.Ditzleretal.,Anal.Chim.Acta,135 1316(1974). [41]M.A.Ditzler,1979,147pp.Avail.Univ (1),69(1982). MicrofilmsInt.,OrderNo.7922745.Pron [5]郭雅先等，环境化学，3(3),57(1984). Diss.Abstr.Int.B,40(4),1671(1979). [46]陈贻文等，色谱，2(6);332(1985). [42]M.A.Ditzleretal.,Anal,Lett.,All(8) [47]陈贻文等，分析化学，15(4),354(1987). 收（稿日期：1987年5月3日） 611(1978). [43]M.A.Ditzleretal.,Anal.Chem.,52(4),614 乙酸乙酯＞乙腈。在浓度相同的条件下，对 试样的相对响应值见表1，可见丙酮和四氢 呋喃作溶剂时，响应值较高，但四氢呋喃纯 度差，本底和噪音较高。用丙酮噪音不大， 响应值比较高。 表 1TCPO的相对响应值 浓（度?0.75mmol/L） 关于H2O2的溶剂，只能用三种溶剂作 比较 （乙酸乙酯ゲ不互溶）结果如表2。综合 表1和表2，结果确定用丙酮作TCPO和 H2O2的溶剂，具有噪音小、响应值高、毒 性小和价格便宜等优点。 表2H2O2的姆发⒐响应值 浓（度0.6mol/L） 表 3 咔唑类化合物的定量 实验证明，TCPO和H2O2溶液的浓度分 别以1.75mmol/L和1Omol/L为最佳，其流 速比在H2O2溶液:TCPO溶液=2:1时，发光 本工作为高效液相色谱