若干杏李品种成熟叶片基因组dna 的提取.pdfVIP

江西农业学报 2008，20(10)：4—6 ActaArgiculturaeJiangxi 几个杏李品种成熟叶片基因组DNA的提取 张慧蓉 ，乔玉山2，曹尚 ，张传来 ，扈惠灵 ，薛华柏 (1．河南科技学院，河南新乡453003；2．南京农业大学 园艺学院，江苏南京210095； 3．中国农业科学院郑州果树研究所，河南 郑州450009) 摘 要：用改良的CTAB法提取几个杏李品种成熟叶片的基因组 DNA，裂解细胞核前先用洗液排除细胞质中的部分多 糖、多酚、丹宁和果胶等物质的干扰；裂解细胞核时，在提取液中加入 乙醇进一步去除多糖，结果表明，提取的基因组总DNA的 纯度和完整性都较好，0D260／OD 值在 1．70—1．93之间，DNA无降解现象，没有多糖污染，可被限制性内切酶消化，所提取的 基因组DNA的SRAP扩增条带清晰，多态性好。说明用此方法提取到了质量合格的杏李基因组DNA，可以用于PCR和限制 性内切酶分析。 关键词：杏李；成熟叶片；改良的CTAB法；DNA提取 中图分类号：S662．3 文献标识码：A 文章编号：1001—8581(2008)10一OO04—03 ExtractionofGenomicDNA from MatureLeavesofSomeVarierie．sof脚 fn．／qsimonii ZHANGHui—rong，QIAOYu—shah，CAOShang—yin，ZHANGChuan—lai，HUHui—ling，XUEHu—bai (1．HenanInstituteofScienceandTechnology．Xinxinag453003。China： 2．CollegeofHorticulture，NanjingAgIiculturalUniversity，Nanjing210095，China； 3．ZhengzhouFruitResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Zhengzhou450OO9，China) Abstract：TheauthorhaveusedtheimprovedCTAB methodtoextractsuccessfullythegenomicDNAfrom matureleavesofsome varietiesofPrunussirrmnii．Firstly，beforecaryonslysisthewashingbufferwasusedtoavoidinterference from amylose，polyphenol， tannin，pectinandSOoninthecytoplasm ；secondly，duringcaryonslysis，alcoholWas mixedintotheextractionbuffertofurtherelimi— nateamylase．TheresultsshowedthattheextractedDNA from thematureleavesbythismethodWas pureandintegra1．thevalueof OD260 ／0D280 Was from 1．70to1．93，thedegradationofextractedDNA Was notfound，theamyloseinDNA Was eliminatedcorn— pletely，andtheDNAWas suitablefordigestionbyrestrictiveendonucleases．SRAPnaalysisindicatedtheprimer(mel／em1)pro- dueedclearpolymorphicpatterns．ThereofrethismethodcouldbeusedtoextractidealDNA samplesfrom thematureleavesofPmn simoniiCart．andwassuitableofrPCR nadrestrictiveenzymeanalysis． Keywords：PⅢn／／,$simonii；Matureleaves；ModifiedCTABmethod；DNAextraction 分子标记技术已经成为植物遗传育种研究的有力工