不同管径TiO2纳米管对小型猪体内种植体的基因表达及骨整合的影响.pdfVIP

京口腔医学 2012年第2O卷第2期 BeiiingJournalofStomatolo~v Aoril2012．Vo1．20．N0．2 ． 国 外 优 秀 论 文 选 登 ． 不同管径 TiO2纳米管对小型猪体 内种植体的 基因表达及骨整合的影响 王娜 吕武龙 李景辉 张振庭 【摘要】 目的 探讨表面具有TiO 纳米管结构的纯钛种植体周围的基因表达以及不同管径的纳米管对种植 体-骨界面成骨的影响。方法 在小型猪体内植入表面具有TiO：纳米管结构的纯钛种植体 ，术后3周、5周和8周 取出种植体骨块，制作不脱钙磨片，利用光学显微镜 ，观察术后3周、5周和8周种植体周围骨的组织学表现；并采 用定量PCR法检测种植体周围alkalinephosphatase(ALP)、osterix(OSX)、collagen—I(COL．I)的表达。结果 与机 械切削的纯钛种植体相比，表面具有TiO：纳米管结构的纯钛种植体在骨．种植体接触面积和基因表达方面都有显 著的增加，尤其是表面具有70nm纳米管的种植体。结论 TiO 纳米管通过调节种植体一骨界面的成骨活动获得 良好的分子应答和骨整合，纳米管的管径可以被精确调控以获得更好的骨生成。 【关键词】 纳米管；种植体；骨整合 种植体与骨之间快速形成稳固而持久的结合对 冲洗数次，吹干，在400oC下热处理2h。TiO：纳米管 临床留存率至关重要。种植体的表面形态对骨结合 结构形态 由场发射 电子显微镜观察，表层晶体结构 起着关键的作用。因此，人们进行了大量关于钛表 由XRD仪分析。 面改性的研究以期促进种植体周围的骨整合作用。 2．实验动物 通过在阳极氧化中控制反应条件可在钛及钛合金表 4O只健康雄性小型猪 ，约8个月大，30～40 ， 面产生TiO：纳米管。研究表明，TiO 纳米管能促进 由中国农业大学实验动物中心提供。 成骨细胞黏附增值与分化，并且表现出很强的骨结 3．手术过程 合能力 ¨引。但有利于细胞生物学功能的最佳管径 实验动物被随机分为8组，每组5头动物，3组 仍有争议 j。本研究通过研究TiO 纳米管的管径 用于组织学观察，其余 5组用于基因检测。 对种植体周围骨组织生成及基因表达的影响，探讨 每头小型猪在顶骨上植人4枚不同类型的种植 其细胞和分子学机制，并确定TiO 纳米管中最有利 体，即机械切削、30nm 纳米管、70nm 纳米管和 于早期骨整合的最佳管径。 100nm纳米管种植体。 4．基因取样 材料和方法 术后 1、2、3、4、5周 ，麻醉后进行取样 ，整个过程 1．种植体 按照RNA保存方案进行。暴露种植体，用八角螺丝 在莱顿公司定制直径3．3mm、长8mm的圆柱形 刀拧下覆盖螺丝，旋人种植体取出器，拔出种植体， 钛种植体。对照组种植体表面为机械切削加工，其 将附有组织 的种植体立 即放人冻存管。用 内径 余种植体先后在丙酮和酒精中超声清洗后，以石墨 4mm的环钻取出种植体周围骨组织放人冻存管，所 为电极在 电解液进行 阳极氧化，电压分别为 10v、 有样本被保存在液氮中，以备实时PCR分析。 20v、30v，作用时间2h。阳极氧化后试件用蒸馏水 5．RNA提取检测及实时PCR 将所取样本加入裂解液以自动匀浆仪进行匀浆