卵巢癌细胞系C-JUN激活蛋白-1与P27~（kip1）表达的相关性.pdf

2009年 9月 基础医学与临床 September2009 第 29卷 第 9期 Basic ClinicalMedicine Vo1．29 No．9 文章编号：1001—6325(2009)09—0955-06 研 究 ~g-文 卵巢癌细胞系 C-JUN激活蛋 白．1与 P27p表达的相关性 朱维培，张 弘 ，钱志红，刘利芬 (苏州大学 附属第二医院妇产科，江苏 苏州 215004) 摘要 ：目的 探讨C—JUN激活区结合蛋白．1(Jab1)与P27 在卵巢癌细胞株HO-8910中的表达变化及相互关系。 方法 用血清饥饿及饥饿后释放处理HO一8910细胞，分别用Westernblot及核浆分离技术检测Jabl、P27 表达及亚 细胞定位 ；用免疫沉淀方法检测Jabl与P27“的结合情况；脂质体介导法将 Jab1基因转染HO-8910细胞，Western blot及核浆分离检测P27“表达。结果 血清饥饿导致H0-8910细胞生长周期停滞 ，P27“蛋白总量增加，且主要 集中分布于胞核；Jabl蛋 白总量减少，主要表达于核质；血清释放后两者呈现相反的表达变化 ，但是P27 主要集 中分布在胞质；P27“与Jabl在H0．8910细胞中存在相互结合的情况。脂质体转染 Jabl后 ，P27“表达下降且定 位有明显的胞质改变。结论 Jabl可能通过与 P27kipl结合来介导 P27“出核并影响其表达 ，从而参与调控 H0-8910 细胞的生长。 关键词 ：C—JUN激活区结合蛋白．1；细胞周期调控因子P27 ；卵巢癌 中图分类号：R737．31 文献标志码：A CorrelationbetweenC—t，洲 activationdomainbindingprotein1andP27i inovariancancercellHO一8910 ZHUWei—pei，ZHANGHong ，QIANZhi—hong，LIULi-fen (DeparmentofObstetricsandGynecology，theSecondHospitalAffiliatedofSuzhouUniversity，Su~ou215004，China) Abstract：ObjectiveToinvestigatetheexpressionandrelationshipofJablandP27“inovariancancercellHO一 8910． Methods Cellsweretreatedwithserum starvationandrelease．TheexpressionanddistributionofJab1 andP27i weredetectedbywesternblotandsubcellularfractionation．HO一8910cellsweretransfected nvitrowith pcDNA3．1．MYC—Jab1．Westernblotaswellassubcellularfractionationwasusedtodetecttheexpressionandlocal— ization0fP27kip Results ThegrowthofH0—8910 cellswasblockedbyserum starvation．P27 increasedwhile ． Jab1decreased．Thereversechangeswerefeundafterserumrelease．P27 andJba 1couldform compoundinHO一 8910cellsdetected by immunoprecipitation．48h aftertransfected bypcDN