叶绿体色素分离的展层溶剂的选择.pdfVIP

维普资讯 叶绿体色素分离的展层溶耕的选择 盐城师专生物系 郝明千 周华萍 纸层析是iI绿体色柰分离的一种最简便的方法。把叶绿体色素混和物样点到滤纸上，当有机溶剂不断 从滤纸上流过时。由于混和物中各成分在两相液间具有不同的分配系数。所以它们的移动速度不同，因而 f电样品混合物分离。在教学实践中，我们发现展层溶剂的种类，’组合及其组合比例，甚奎添加物的投入对 色素分离的效果，即分离速度、色素分辩率，色斑能见度影响很大。现用的教本及实验指导书中介绍的展 膳剂实验效果很不…致。针对实验中存在的问题，我们将常用的有机试剂进行分别试验，以‘选择 一个恰 的展层溶剂种类及组合儿测，旨在提高州绿体色素分离的效果。 ‘ l试验过程 ． ， 一 ． 、 。 ‘ J ． 1 ． t 供试村料与样 品处理 T ’ II 供试材料：青菜绿口li。 、 J F 。 {I品处理；称取2g青菜叶剪本放入 中：加5 丙1酮 §璃摹砂袖c 6 研垂 浆，罚丙 酮洗滤，定溶5~10m]。 1． 展层方式与指标方案的确定 展层方式：环形纸层析。装置见图1。 A．层析纸 ( 】8cn【)； P．着样纸捻(15X2cm)着样0．st：m宽； ^ ．一 n ． C 1．S．培养皿盖(或底)，4Scm； ． ． 2．层析纸_A； ； · 图 1 ．环形纸层析装置 3．着样纸捻Ij， 4．培养皿盖，46cm： 6．展层溶剂，lamI，。 试验指标方案的确定： a ． 在层析纸上距园 为5~m处标点，以观展层溶剂到达时间，确定时绿体色素分 的雌度。 b．以相邻两种色素韵Rf值的差决定色素分辩率的大小o ． ¨ c．以每种色素肉眼能看清楚的程度为色斑能见度a d．每种展屠剂重复试验三次 ‘ ． ’ ； ’ ． 、． 一 2 试验结果与讨论 ． ， ． 2．1 单种展层溶济的试验选择 r j 首先；对实验室里常用