SD大鼠原代颌下腺细胞体外培养方法的改良.pdfVIP

床医学I 医学信息2010年12月第23卷第12期Medieallnformati0n．Dec．2010．Vo1．23．No．12 SD大鼠原代颌下腺细胞体外培养方法的改良 王炎林 。张永莉 ，樊 霞 (1．延安大学医学院，08级研 究生，陕西 延安 716000；2．延安大学附属医院内分泌科 ，陕西 延安 716000； 3．延安大学医学院．陕西 延安 716000) 摘要：目的 研 究5D大鼠颌下腺细胞体外培养的方法，使细胞能顺利 的在体外培养并能提供有功能的神手细胞。 方法 获取新生SD大鼠幼仔 颔下腺组织，经酶消化后培养，以PBS和DMEM+F12为冲洗液，比较两者对细胞生长的影响。 结果 体外培养的颌下腺细胞以DMEM+F 为冲 洗液细胞能持 续的生长。 结论 体外培 养的颔下腺 细胞以DMEM+F 为冲洗液能获得增殖活跃传代细胞，并为颌下腺研 究提供种子细胞。 关键词 ：颌下腺细胞；体外培养；DMEM+F12和PBS ImprovingSD RAT SubmandibularGlandCellsinPrimaryCultureM ethod W ANG Yan—lin，ZHANG Yong—li，FAN Xia (1．3，MedicalCollege，YananUniversity；2．AffiliatedHospital，YahanUniversity，Yahan716000，China) Abstract：ObectiveTostudytheSD ratsubmandibularglandcellsinvitromethod，thecellscab besuccessfullyculturedinvitroandprovidethe functionalseedcells．MethodsNeonatalSDratpupssubmandibularglandtissuebyenzymaticdigestionandcuhured．withPBSandDMEM + Fl2as thewashingliquid，tocomparetheeffectsO11cellgrowth．Results Thecultured submandibularglandcellstoDMEM + FI2forthefluidcellcan continuetogrow．ConclusionInvitroculturedsubmandibularglandceilsDMEM +Fl2togetactiveproliferationfluidpassagecells，canprovideseed forthesubmandibularglandcells． Keywords：Submandibularglandcell；vitrocuhure；DMEM +Fl2andPBS 在SD大鼠颌下腺细胞的培养 中，为了获得增殖活跃，有功能的 培养瓶中，在37℃，5％CO，95％0：孵育箱中培养，48—72h首次换液。 种子细胞，我们通过本实验进行颌下腺细胞的培养，并对培养方法 新提取的细胞 2h后开始贴壁，3d后细胞大部分贴壁，并伸展变形， 进行了改良，结果获得了增殖旺盛分化 良好的传代颌下腺细胞，并 呈梭形，三角形 ，长方形，以铺路石状，条索状排列，8d左右细胞形 能应用于颌下腺细胞的T：程研究。 成”鹅卵石”样结构，lOd左右细胞 已非常密集，胞浆内可见明显的分 1材料来源 泌颗粒 Io 颌下腺标本取 自出生 8天的SD大鼠乳鼠，(西安交通大学医学 3培养方法的改良 院实验动物中心提供)。含 10％胎牛血清的DMEM+F为培养基 (含 常规的细胞换液一般是适量的PBS冲洗 2—3次后，加培养基培 301~g／ml氨苄青霉素，201~g／ml链霉素)。DMEM+F，为赛默飞世尔生 养，但在本