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维普资讯 两种微藻凝集素对几种不同类型细胞的凝集作用 郑 怡 ，陈晓清。，林雄平。 (1．发育与神经生物学福建省高校重点实验室，福建师范大学 生命科学学院，福建 福州 350108；2．漳州师范 学院生物科学与技术系，福建 漳州 363000；3．宁德高等师范专科学校 生物系 ，福建 宁德 352100) 摘要：经离子交换和分子筛层析从紫球藻 (Porphyridiumcruentum)和海水小球藻 (Chlorellasp．)中分离纯 化得到 2种凝集素 ，研 究它们对几种不 同类型细胞 即动物和人血红细胞 、海洋和淡水微藻 、细茵和真菌的凝 集活性 。研究结果表明，2种微藻凝集素对它们当中一些类型的细胞或种类具有不 同程度的凝集活性，其 中 对水生聚胞藻 (Synechocystisaquetilis)的凝集活性最强 ，最低质量浓度 只需0．0313g／L。 关键词 ：微藻；凝集素 ；细胞 ；凝集 中图分类号 ：Q949 文献标识码 ：A 文章编号 ：l0003096(2008)06—0030—05 凝集素是一类非免疫起源 的蛋 白质或糖蛋 白， 0．01mol／L，pH7．2，内含 NaC10．14mol／L)浸提 ， 能与相应的糖或糖蛋 白分子专一性结合 ，由于这一 收集上清液，后加入 固体硫酸铵 (30 ～85 饱和 独特的性质 ，使它们在生物化学和医学等领域有着 度)，离心 (5000r／min，20rain)收集沉淀，加PBS溶 广泛的用途L1]。凝集素最早是在植物 中发现 ，长期 解 ，透析除盐后 ，风干浓缩 ，检测凝血活性 ，获得凝集 以来研究最多 、最活跃的也是植物凝集素 ，其 中又以 素粗制 品。粗 品经 DEAE～纤维素 52(1．6cm × 种子植物凝集素为主，而藻类凝集素的研究显得相 30cm)离子交换层析，用含不 同浓度 NaC1的 PBS 对滞后 ，起步较晚 ]。近 10来年大型海藻凝集素的 溶液洗脱，收集活性峰部分 ，再经 SephadexG一100分 研究在纯化数量和性质方面取得 了较大 的进展 ]， 子筛层析 (1．6cm×50cm)洗脱 ，分部收集活性峰部 但关于微藻凝集素的研究还很少 ，目前分离纯化的 分 ，经风干浓缩 ，获得纯化样 品，蛋 白质浓度测定采 只有几种 ，因而对它们性质的了解十分有 限，在生物 用 CBB—G250法，纯化 样品用不连续 聚丙烯 酰胺凝 学活性研究方面还几乎是空 白 ~7]。细胞凝集作用 胶电泳 (PAGE)测定纯度。凝集素配成 1g／I，分别 是凝集素最基本 的特征和最重要的生物学功能之 用于不同类型细胞的凝集实验 。 一 ， 本实验利用从紫球藻 (Porphyridiumcruentum) 1．3 不同类型细胞 的凝集实验 和海水小球藻 (ChIoreIIasp．)中纯化的2种凝集素 ， 1．3．1 动物和人血红细胞 的凝集实验 研究它们对一些不 同类型细胞的凝集作用 ，为微藻 各种动物和人血 (A型、B型、O型及 AB型)样 凝集素的生物学活性研究提供一些重要的信息 。 品加入抗凝剂 (Alsever)置 4~C保存备用。实验时血 1 材料与方法 样经离心 (1000r／min，10min)收集红细胞 ，用约 10 倍量的生理盐水离心洗涤 2次后 ，配制成 2 积压的 1．1 材料 血红细胞悬液，凝集