测定生姜蛋白酶活性的新方法.pdfVIP

热带作物学报 2011，32(8)：1475—1478 ChineseJournalofTropicalCrops 测定生姜蛋白酶活性的新方法 于 洁，肖超妮，王世祥，郑晓晖 西北大学生命科学学院．陕西西安 710069 摘 要 通过对生姜蛋 白酶进行分离纯化．并将其加热使酶失活作为参照 ．用考马斯亮蓝染色法测定蛋 白酶活 力 。研究了pH值、温度 、EDTA和金属离子 (Na+，Mg2+，Cu2+，Ca)等因素对生姜蛋 白酶活性的影响。结果表 明，以失活的生姜蛋 白酶为参照，可以简洁的测定出生姜蛋 白酶的活性 ，与 已往测定生姜蛋 白酶活性相 比较 ， 具有方法简单 ，消除腐蚀危害 ．可望简洁而环保的测定出生姜蛋 白酶的活性 关键词 生姜蛋 白酶 ；加热使酶失活；参照；酶活测定；考马斯亮蓝 比色法 中图分类号 0814．1 文献标识码 A A New M ethod forDetecting GingerProteaseActivity YU Jie，XIA0 Chaoni，WANG Shixiang，ZHENG Xiaohui ThecollegeofZ science，NorthwestUniversity,Xi Shanxi710069,China Abstract In thispaper，a new method for detecting ginger protease activity was proposed by using inactive ginger protease as a reference．Coomassie brilliantblue staining method was employed to detectthe activity of gingerprotease．Theinfluenceofsomefactors，suchasthepH，temperature，metallicions(Na，M ，Cu“，Ca) and EDTA on the activity of the protease was discussed．Th e results indicate thattaking the inactive ginger protease as a reference could detectthe activity ofgingerprotease laconically，which exhibited the advantagesof simplicity and avoidingtheharmfulnessofcorrosive substanceascompared to otherdetectingmethod． Key words Ginger protease；Inactivate the enzyme by heating；Reference；Determination of enzyme activity； Coomassiebrilliantbluecolorimetrie method． doi 10．3969／j．issn．1000—2561．2011．08．018 生姜蛋 白酶 (Gingerprotease．Zingibain)是一 蛋 白酶水解牛血清白蛋 白后．以牛血清 白蛋 白的剩 种新型水解蛋 白质的催化剂 ．能特异地水解 P2位 余含量来表达生姜蛋白酶的活性．此过程需加盐酸 脯氨酸的肽键 ．其活性 中心含有丝氨酸 ．与木瓜蛋 控制其反应进程 ．所使用的强酸试剂盐酸具有很强 白酶和菠萝蛋 白酶一样 ．是一种硫醇蛋 白酶[1-2]。 的腐蚀性和刺激性。本研究尝试通过加热生姜蛋 白 它主要应用于 肉的嫩化 ．果蔬汁 、酒类 的澄清 ， 酶使其失活后做为参照．省去上述各种方法中需要 动、植物蛋白的分解 ，焙烤食品中面团调节剂，乳 使用离心和强酸试剂等的步骤 。消除其腐蚀危害 ． 制品凝 固剂、化妆品添加剂等。郝桂霞3[1等 以酪蛋 可望简洁而环保 的