菊花防护晶状体上皮细胞氧化损伤及信号转导机制的实验研究.pdfVIP

福建 中 医学 院学 撤 2008年 l2月 第 18卷 第 6期 JournalofF@anUMve~iW ofTCM 1)ecember2008，18(6) 26 菊花防护晶状体上皮细胞氧化损伤及信号转导机制的实验研究 祁明信 ，黄秀榕 ，严 京 ，吴正正 ，胡艳红 (1．福建 中医学院附属第二人 民医院，福建 福州 350003；2．福建 中医学院病理生理研究中心，福建 福州 350003) 摘要 ： 目的 通过菊花影响过氧化氢 (HO：)氧化损伤 的晶状体上皮细胞 (LEC)内钙 (Ca )、环 磷酸腺苷 (cAMP)、环磷酸鸟苷 (cGMP)信号转导 的实验研 究，探讨归肝经明 目中药防治 白内障的细 胞和分子机制 。 方法 将传代培养的牛 LEC与 H2o 共 同孵育复制氧化损伤模型，同时加入菊花 水提取液孵育后 ，四 甲基偶氮唑蓝法 (MTT)检测LEC活性 、荧光分光光度法检测 LEC 内的钙离子浓 度 (C『a：1i)、放射免疫分析法检测 LEC 内cAMP和 cGMP含量 ，探讨不 同浓度菊花及孵育 12h、24 h和36h的影响。 结果 ① Ho：组LEC活性下降，菊花使氧化损伤的LEC活性显著增高(P 0．01)．呈浓度依赖关系和时间依赖关系。( H202组LEC的 [Ca抖]。升高，菊花使氧化损伤所致的 LEC的[ca：]。显著降低 (PO，O1)，并呈时间一效应关系。③ H0：组LEC的cAMP浓度升高、cGMP 浓度 下 降．菊花可使氧化损伤 的 LEC 的 cAMP水平显著 降低 (P0．01)、cGMP水平显著升 高(P 0．01)，也呈时间一效应关系。 结论 通过 [Caz]。、cAMP和cGMP信号转导 系统及其相互作用调节 生物学效应 ，可能是菊花防护 LEC氧化损伤及减少细胞凋亡的细胞和分子生物学机制 。 关键词 ：菊花 ；晶状体上皮细胞 ；氧化损伤 ；钙 ；cAMP；cGMP 中图分类号 ：R2—03l 文献标识码 ：A 文章编号 ：l004—5627(2008)06—0026—04 菊花 (FlosChrysanshemi，FC)味甘 、微寒 ，归 四乙酸 (ethylenediaminotetraaceticacid，EDTA)、胰 肝 、肺经 ，主要含绿原酸 ，具有平肝 明 目的功效 。 蛋 白酶 (trypsin)、四甲基偶氮唑蓝 (methylthiazolyl 《中华人民共和 国药典》将菊花列为归肝经明 目中 tetrazolium，MTT)、二 甲基亚砜 (dimethylsulf0xide， 药。作者基于对 “肝开窍于 目”、“肝气通于 目，肝和 DMSO)均购 自华美生物工程公司．分别是美国Sig． 则 目能辨五色矣”的认识 ．对 中药菊花防治 白内障 ma公司、美 国GIBCO公司、美 国Augus公司和美 的作用进行过研究。发现菊花可减轻 Fenton反应 国Amresco公司产品。中药菊花 (产地浙江桐 乡)由 所致的新西兰 白兔离体 晶状体的混浊程度、对 晶 福建省第二人民医院中药房提供并 由副主任药师 状体氧化损伤有 防护作用。进一步的研究表明其 鉴定 。胎牛血清 (fetalbovineseHlm，FBS)购 自杭州 防护作用是通过提高晶状体 中酶性和非酶性抗氧 四季青生物工程有 限公司。30％H：O 系上海试剂 化剂 、减少 晶状体上皮细胞 lencepithelialcell， 总厂产 品，生产许可证号 XK13一O010801022。 I— LEC)凋亡 、通过凋亡相关基 因(上调 Bcl一2、下调 cAMP、I—cGMP放免试剂盒来 自上海 中医药大学 Bax)调控 的机制[1~ 。本文拟进一步研究菊花对过 同位素室。 氧化氢 (H：0：)所致氧化损伤 的LEC内钙 (Ca2十‘)、