高效液相色谱-电喷雾质谱法测定青稞幼苗提取物氨基酸sup1;.pdfVIP

第29 卷, 第 3 期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 9 , No . 3 2 0 1 2 年 5 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y L aboratory May , 2 0 1 2 高效液相色谱-电喷雾/ 质谱法 测定青稞幼苗提取物氨基酸¹ a, b a,b a a º a 王 萍 　陈涛 　杜玉枝 　沈裕虎　李玉林 a( 中国科学院西北高原生物研究所　西宁市新宁路23 号　 1000 ) b( 中国科学院研究生院　北京市石景山区玉泉路19 号甲　100049) 　以2-[2-(7H-二苯并[ a, g] 咔唑-乙氧基) -乙基] 氯甲酸酯( DBCEC-Cl) 作为柱前衍生试剂, 采 用高效液相色谱-电喷雾/ 质谱法( HPLC-ESI/ MS) 对青稞幼苗提取物中的氨基酸进行了测定。结果表明, 青稞幼苗提取物中含有13 种氨基酸, 总含量为 1. 6mg/ g, 其中有人体自身不能合成的6 种重要氨基酸 [ 赖氨酸( Lys) 、蛋氨酸( Met ) 、亮氨酸( Leu) 、异亮氨酸( Ile) 、苏氨酸(T hr) 和缬氨酸( Val) ] , 含量达 41. mg/ g, 占总氨基酸的51. 2% 。该方法灵敏、可靠、重现性好, 是一种理想的全谱氨基酸分析方法。 青稞; 氨基酸; 高效液相色谱-电喷雾/ 质谱法; 2-[ 2-( 7H-二苯并[ a, g] 咔唑-乙氧基) -乙基] 氯 甲酸酯 : 657. 63: : 1004- 13 (2012) 03-1351-05 O B 1　引言 青稞( . . . . ) 属于禾本科大麦属作物, 是藏族人民最主要的 H ordeum vulgare L var nudum Hook f 粮食作物, 主要分布在我国西藏、青海等高海拔寒冷地区。近年来, 青稞丰富的营养和保健作用得到 [ 1] 现代医学的证实 , 其叶的药用价值很早就被开发出来, 本《草纲目》中就有 “麦苗, 解蛊毒, 煮汁滤 服。除烦闷, 解时疾狂热, 退胸膈热, 利小肠, 作斋食, 甚益颜色…”的记载。研究表明青稞叶营养丰 富, 含有丰富的黄酮、氨基酸等营养物质, 具有减肥、降脂、抗氧化、抵御酒精性胃炎出血、增强耐力 [ 2] 等医疗保健作用 。 氨基酸是构成生命有机体蛋白质的基本物质单元, 也是生命代谢过程中不可缺少的营养物质。 目前, 氨基酸的测定多采用离子交换色谱法( IEC) 、高效液相色谱法( HPLC) 和气相色谱法( GC) 等 [ 3] [ 4, 5] [ 6] [ 7] 方法。这些方法多采用紫外 、荧光 、氢火焰离子化 和化学发光检测 。多数氨基酸仅表现出 弱的紫外吸收, 直接紫外检测难以获得满意的灵敏度, 因此进行化学衍生是提高该类化合物检测灵 [ , 9] 敏度的有效途径 。2-[ 2-( 7H-二苯并[ a, g] 咔唑-乙氧基) -乙基] 氯甲酸酯对氨基酸的标记不仅灵 敏, 同时由于分子侧链上引入一个强电负性氧原子的二聚乙二醇醚链后, 表现出强的质谱灵敏度, 同时试剂与氨基酸的标记产率高、产物稳定, 已成功用于黄金蝉若虫体蛋白水解液的荧光标记及电 [ 10] 喷雾/ 质谱鉴定 。本研究以2-[ 2-( 7H-二苯并[ a, g] 咔唑-乙氧基) -乙基] 氯甲酸酯作为柱前衍生试 剂, 采用高效液相色谱-电喷雾/ 质谱法( - / ) 对青稞幼苗提取物中