好氧堆肥高温期纤维素酶活及β-glucosidase GH1家族阳性微生物群落的相关研究.pdfVIP

好氧堆肥高温期纤维素酶活及β-glucosidase GH1家族阳性微生物群落的相关研究.pdf

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第42卷第9期 东 北 农 业 大 学 学 报 42(9):119-124 2011年9月 JournalofNortheastAgnculturalUniversity Sep.2011 好氧堆肥高温期纤维素酶活 一gIUCOSidaseGH1家族阳性微 生物群落的相关研究 李洪涛,许修宏 ,卢新颖,徐 莹,吕 盈,李 欣 (东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨 150030) 摘 要 :以固相酶活试验方法检测牛粪一稻草堆肥高温期的CMC酶活性和卢一葡萄糖苷水解酶活性,分析结果 表明,两种酶活变化存在相关性,并受堆肥过程中的理化因素影响。设计简并引物,应用PCR—DGGE技术郴 一葡 萄糖苷水解酶GH1家族阳性的微生物群落的组成,及其时空分布进行研究,试验结果显郡 一葡萄糖苷水解酶相关 的功能性微生物群落在堆肥的进程中存在演替现象。 关键词:堆肥;固相酶活试验;变性梯度凝胶 电泳(DGGE); 一葡萄糖苷水解酶 中图分类号:X172 文献标志码:A 文章编号:1005—9369(2011)09—0119-06 MonitoringofmicrobialpopulationsbyPCR-DGGE targetingfamI- Iy1J5;一gIucosidasegenesandcellulaseactivityduringthermophil· icphaseofcomposting/uHongtao,XUXiuhong,LUXinying,XUYing,LVYing,LI Xin(CollegeofResourcesandEnVironmentaISciences,NortheastAgriculturalUniversity, Harbin150030,China) Abstract:An enzymeactivityassay in solid phasewasdevelopedto investigatethe enzmye dynamicsofCMCaseand~gluocsidaseduringthethermophilicphaseofcattlemanure—ricestraw composting.The enzymeactivitiesmonitored inthis studywere able torevealthe dynamicsofthe activityofbothcellulaseand~gluocsidasecouldbeattributedtotheabioticparametersofcomposting process.Furthermore~-glucosidaseactiviytwasfoundpositivelycorrelatedwithCMCase.Thechanges thatoccurredinabacterialcommuniytbyPCR·d·enaturinggradientgelelectropho··reses(DGGEs)was analyzed,targetingthefamily1~-glucosidasegenes.Theresultsshowedthatthestructureofmicrobial communiyt changedwithcompostingtime.Themajorbandsweresequencedandcomparedwith sequencesobtainedfrom DNA databasebyphylogeneticanalysis. Keywords:compost;solidphasekineticassay;PCR-DGGE;~glucosidase 好氧堆肥是国内外有机固体废弃物处理采用 一 葡萄糖苷水解酶 (BGL,E.C.3.2.1.21)等纤维素 的主要技术之一。在好氧堆肥处理有机固体废弃 酶系统 中多酶组

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