饲料中盐酸克伦特罗的测定 ——胶体金免疫层析法.pdfVIP

ICS 备案号： DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 818—2008 饲料中盐酸克伦特罗的测定 ——胶体金免疫层析法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施 安徽省质量技术监督局 发布 DB34/T 818—2008 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省质量技术监督局批准。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。 本标准起草人：许世富、蔡东东、汤春莲、明文庆。 本标准于2008年8月1日首次发布。 I DB34/T 818—2008 饲料中盐酸克伦特罗的测定 ——胶体金免疫层析法 1 范围 本标准规定了用胶体金免疫层析法检测饲料中的盐酸克伦特罗。 本标准适用于饲料中盐酸克伦特罗的快速检测。 本标准检测限为10µg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 本试验为竞争抑制法。将氯金酸用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒，标记抗体。硝酸纤维素膜为 载体，利用了微孔膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移。在移动的过程中，会发 生相应的抗原抗体反应，并通过免疫金的颜色而显示出来。样本中的盐酸克伦特罗在流动的过程中与胶 体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素（NC ）膜检测线上盐酸克伦特罗－BSA 偶联物的结合，使检测线不显颜色，结果为阳牲；反之，检测线显红色，结果为阴性。 4 试剂和材料 除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合 GB/T 6682 二级水的规定。 4.1 胶体金免疫层析快速检测装置组成 4.1.1 盐酸克伦特罗全抗原的偶联率为 1：10～1：20 （ BSA：CL）。 4.1.2 抗盐酸克伦特罗抗体、多抗或单杭。多抗可以由兔或羊血清获得，效价应大于 5000（间接ELISA 法），或有效抗体含量应大于 0.05mg/mL；特异性应大于 5000（间接抑制ELISA法）。单抗由鼠腹水获 得，效价应大于 15000（间接ELISA法），或有效扰体含量应大于 0.5mg/mL；特异性应大于 5000（间接 抑制ELISA法）。抗体相对亲和力为 3.56×109 （结合率下降 50％时，相对应的抗体浓度的例数）。 4.1.3 样品垫：玻璃纤维或纸质薄片。 4.1.4 金释放垫：玻璃纤维片，免疫金释放时间小于 5min，释放效率大于 80％。 4.1.5 NC 膜：孔径为 0.45μm，4cm 毛细管时间不小于 140s。 4.1