单克隆抗体高分离度分离和定量SEC方法开发和部分验证.pdfVIP

安捷伦应用解决方案 单克隆抗体高分离度分离和定量SEC 方 法的开发和部分验证 配备Agilent Bio SEC-3 色谱柱的Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统 应用简报 生物制药 mAU 作者 300 250 200 M. Sundaram Palaniswamy 150 100 安捷伦科技有限公司 50 印度班加罗尔 0 5 10 min 摘要 体积排阻色谱 (SEC) 是用于高分子物质 （如蛋白质或聚合物）表征的重要技术。它是 测定和定量蛋白质类药物聚集水平的标准方法，并且通常为监管审批所必需。本应用 简报介绍了一种用于单克隆抗体 (mA b) 定量分析的简单且灵敏的 S EC 方法。采用配 有Agilent Bio SEC-3 色谱柱的Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统来实现 mAb 的分离和定量。Bio SEC-3 色谱柱是体积排阻色谱领域的一项突破性技术。该型色 谱柱填充了涂布有专利亲水层的球形、窄粒径分布的3 µm 硅胶填料。使用蛋白质分子 量标准校正色谱柱。通过单克隆抗体的验证性研究证实了用于常规分析时方法的稳定性。 此外，Bio SEC-3 色谱柱还可用于分离和检测 mAb 聚集体。仪器具有生物惰性和耐腐蚀 性，再结合简单且重现性好的方法，使得该解决方案非常适用于生物制药行业中单克隆 抗体的QA/QC 分析。 前言 仪器设备 软件 安捷伦化学工作站B.04.02 （或更高版本） 单克隆抗体 (mA b) 属于免疫球蛋白 (Ig) 仪器 家族中的糖蛋白。它们可以用来治疗几 采用完全生物兼容且最大系统耐压为 SEC 参数 种危及生命的疾病，例如癌症、炎症性疾 600 bar 的Agilent 1260 Infinity 生物惰性四 采用 1260 生物惰性液相色谱系统的SEC 病，以及器官移植、传染性疾病和心血管 元液相色谱系统，由以下几个模块组成： 色谱参数见表1。 疾病的并发症。与其它所有蛋白质治疗药 物类似，mA b 也会在其生产、储存和运 • Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液 试剂、样品与材料 输过程中发