骨骼肌收缩及线粒体功能研究细胞模型华南师范大学体科院.pptVIP

We suggest that the sensation of fatigue is the conscious awareness of changes in subconscious homeostatic control systems, and is derived from a temporal di-fference between sub-conscious representations of these homeostatic control systems in neural networks that are induced by changes in the level of activity. 骨骼肌收缩及线粒体功能研究的细胞模型华南师范大学 体科院徐晓阳教授 对运动性疲劳的长期研究表明，不同强度、不同持续时间的运动，其疲劳的发生特点、原因等是不同的。长时间、大强度强度运动的疲劳，骨骼肌收缩功能的不能正常实现，与线粒体功能的运动性改变关系密切。 1．细胞收缩与线粒体功能 有研究表明，时间、频率、强度适宜的耐力训练6周，就可使骨骼肌细胞中线粒体的含量增加50~100%。这种改变，由于提高了单位骨骼肌组织利用氧的能力，无疑可以提高耐力运动的成绩。 单位重量肌肉中线粒体数量的增加，可使骨骼肌细胞对ADP浓度的下降更为敏感。它可以更快的启动有氧氧化代谢供能，而减少糖酵解供能，并因此减少乳酸的产生，增加对乳酸的氧化能力，减少乳酸转运入血。 骨骼肌细胞内线粒体数量的增加，还可增加骨骼肌细胞更多的氧化脂肪酸来供能。同时，由于应对相同负荷时，每一个线粒体的氧耗下降了，ROS生成也可减少。 由于运动训练需能量增加，线粒体氧耗加大，自由基产量也上升，可能会因此诱导细胞凋亡的增多。有氧运动训练可提高骨骼肌细胞线粒体利用其自身活性氧的能力，机制可能与活性氧产物诱导线粒体修复性合成有关。这种合成可消除自由基对线粒体DNA的损伤。 2．收缩对线粒体功能影响的机制 运动收缩作用可增加骨骼肌细胞中线粒体蛋白质的合成，并引起相关的mRNA含量上升。这种增加，是以骨骼肌细胞由于运动收缩而打破了已有的复制和翻译适应稳态为基础的，无疑要通过细胞基因表达的增加来实现。 启动这种表达增加的信号包括ATP合成加速，及ATP供需关系的失衡，Ca2+内流等。这些由运动激发的信号会迅速激活有关的激酶，后者又可使转录因子磷酸化，并与DNA上游调控区结合，改变转录速度。 用在体研究的方法很难精确证明这点，而用C2C12细胞的研究发现：电刺激C2C12细胞（5Hz，65V，3h/d，共4天），其中的细胞色素C mRNA含量较对照增加了1.6倍。 用不同的翻译阻断剂，如Na+或Ca2+通道阻断剂、ATP合成抑制剂等可以消除收缩增加细胞色素C mRNA含量的作用，因此，研究者们认为线粒体蛋白质在收缩刺激下表达增加的调控可能发生在翻译水平。 3．运动性疲劳与线粒体 大量关于一次性力竭运动对线粒体结构影响的研究表明：运动后线粒体内膜脂质过氧化物增加，NADH-CoQ还原酶、细胞色素C还原酶活性下降，膜流动性下降，线粒体超微结构呈现缺氧损伤性改变。 运动引起的骨骼肌细胞的凋亡，可能与其中线粒体膜电位的降低有关；而这种凋亡可能与其它因素共同参与了运动性疲劳的发生和发展；自由基代谢平衡的破坏，与细胞凋亡和坏死有密切的关系。 在线粒体途径的运动性疲劳的发生中，是否也存在电子漏引发质子漏，进而导致线粒体ATP合成解偶联的机制？ 线粒体在完成其产能功能的同时，可能引起细胞内环境酸化，并导致其温度的升高。线粒体的态4呼吸可引起H+“泄漏”出线粒体，聚集在胞液中。同时，由于电子漏、质子漏现象的加剧，ATP合成出现解偶联现象，导致用于合成ATP的能量下降，用于产热的能量增加。 4. C2C12细胞 C2C12细胞是培养的小鼠骨骼肌母细胞株，由于它可以在培养过程中进行分化，形成成熟的骨骼肌细胞，因此可用来进行有关骨骼肌细胞的研究。由于该细胞还可对外源性cDNA进行表达，因此也是研究肌细胞某些蛋白成分结构功能的材料。 C2C12细胞在培养时，可以合成出与骨骼肌细胞相同的蛋白质，包括完成收缩功能必不可少的快慢肌纤维、肌球蛋白重链、肌钙蛋白、以及肌动蛋白等，并能完成与在体骨骼肌细胞同样的钙引发的收缩，其收缩力量—钙浓度变化曲线也与后者相同。 6．建立骨骼肌收缩 和线粒体功能 研究的细胞模型 　　１． C2C12细胞在收缩功能