对肝癌细胞HNF1基因表达调控作用.pdfVIP

·６４６· ＣｈｉｎＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１３，Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ１１ ·论　　著 · ＰＡＸ６对肝癌细胞 ＨＮＦ１ 基因表达的调控作用 α １＃ １，２ ２ １，２＆ 张蓝天 　丁晨虹 　汪培钦 　张　新 １ ２ 华东理工大学生物工程学院 （２００２３７）　第二军医大学附属长征医院消化内科 　　背景：前期研究显示肝细胞核因子１（ＨＮＦ１）在人肝细胞癌（ＨＣＣ）中表达下调，上调ＨＮＦ１ 表达可显著抑 α α α 制ＨＣＣ细胞增殖和小鼠肝脏原位移植瘤生长。然而ＨＮＦ１ 在ＨＣＣ中表达下调的机制仍有待明确。目的：探讨 α ＨＣＣ细胞中ＨＮＦ１基因表达调控的分子机制。方法：应用ＪＡＳＰＡＲ软件预测ＨＮＦ１ 启动子上潜在的转录因子结 α α 合位点。联合应用含ＨＮＦ１启动子的报告基因系统荧光素酶活性检测和点突变技术，研究ＪＡＳＰＡＲ软件预测的配 α 对盒基因６（ＰＡＸ６）对ＨＮＦ１启动子转录活性的影响；以染色质免疫共沉淀实验检测ＰＡＸ６与ＨＮＦ１ 启动子的相 α α 互作用，实时荧光定量ＲＴＰＣＲ（ｑＲＴＰＣＲ）和蛋白质印迹法验证ＰＡＸ６对ＨｅｐＧ２细胞内源性 ＨＮＦ１ 表达的影响； α ｑＲＴＰＣＲ检测ＰＡＸ６、ＨＮＦ１ 在人ＨＣＣ组织样本中的表达，并以Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关系数分析两者间的相关性。结 α 果：ＰＡＸ６可直接结合至ＨＮＦ１ 的启动子区域，在转录水平促进 ＨＮＦ１ 表达。人 ＨＣＣ组织中ＰＡＸ６表达明显降 α α 低，并与ＨＮＦ１ 表达呈显著正相关（ｒ＝０．７５３０，Ｐ＜０．０００１）。结论：ＰＡＸ６可调控ＨＣＣ细胞中的ＨＮＦ１ 基因表 α α ｓ 达，其表达下调可能与ＨＣＣ的发生、发展有关。 关键词　肝细胞核因子１；　启动子；　ＰＡＸ６转录因子；　转录，遗传；　癌，肝细胞 α １ ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＨＮＦ１ ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒＣａｒｃｉｎｏｍａＣｅｌｌｓｂｙＰＡＸ６　ＺＨＡＮＧＬａｎｔｉａｎ，ＤＩＮＧ α １，２ ２ １，２ １ Ｃｈｅｎｈｏｎｇ ，ＷＡＮＧＰｅｉｑｉｎ，ＺＨＡＮＧＸｉｎ ．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，