从干种子中快速获取高质量DNA的高盐提取方法.pdfVIP

中圊感爹c亟攉 2011,27(24)：98-102 ChineseAm-iculturalScienceBulletin 从干种子中快速获取高质量DNA的高盐提取方法 张富丽 ，陶 李 ，佟洪金 ，刘 勇 ，宋 君 ，尹 全 ，李 忆 ，代晓航 ，雷绍荣 ，游米沙 (四川省农业科学院分析测试中心，成都610066；四川省环境保护科学研究院，成都610064； 四川省农业科学院植保所，成都610066；四川民族学院，四川康定626001) 摘 要：为寻求一种从植物干种子中简单快速提取高质量基因组DNA的有效方法进行本研究。将种子 打磨成粉 ，取 100mg粉末加入高盐提取液抽提基因组DNA。采用超微量分光光度计检测、PCR及酶切 的方法检验DNA的得率和质量。从 100mg7种常见作物种子粉末中可以得到619．67～1811．21ng基因 组DNA，A26o／：。比值在 1．87～2．07之间，其纯度和质量适合进行PCRTL酶切分析。通过普通PCR方法 分别对7种作物的特异性 内源基因片段进行扩增，结果均能扩增到明显的 目的条带。用EcoRV和 HindlII两种核酸 内切酶能对所得的DNA充分酶切。结果表明本方法能快速地从干种子中提取到高质 量的DNA。 关键词：基因组DNA；聚合链式反应 ；高盐提取；干种子 中图分类号：Q812 文献标志码：A 论文编号：2011—1268 AMethodofSimpleandRapidSalt-extractionofHighQualityGenomicDNAfromPlantSeeds ZhangFuli，TaoLi，TongHongjin，LiuYong，SongJun，YinQuan，LiYi， DaiXiaohang，LeiShaorong，YouMisha (AnalysisandDeterminationCenter,SichuanAcademyofAgricuhuralSciences，Chengdu610066； 2SichuanResearchAcademyofEnvironmentalProtectionScience，Chengdu610064； PlantProtectionResearchInstitute，SichuanAcademyofAgricuhuralSciences，Chengdu610066； SichuanUniversityforNationalities，KangdingSichuan626001) Abstract：Tofindanew simple，fastandhighqualitygenomicDNA extractiontechniquefrom driedseeds，this experimentwascarriedout．Theseedsweregroundtopowder．100mgpowderofseedswasputinaneppendoff tubeandthegenomicDNA wasextractedbyourmethod，respectively．Thefinaleluatewasdetectedby ultramicroUV／Visspectrophotometer．ThepurityandqualityofthegenomicDNA extractedwasconfirmedby PCR andenzymedigestionanalysis．619．67to1811．21ngofgenomicDNAwasextractedrfom 100mgdried seedsforallindividualssampled，andtheA260／A280ratioofDNAsampleswasrfom 1．87to2．07．Thepurityand qualityofthegenomicDNA solutioncouldbeconsideredSOhighthatitwassufficientofrenzymedigestio