从干种子中快速获取高质量DNA的高盐提取方法.pdfVIP

从干种子中快速获取高质量DNA的高盐提取方法.pdf

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中圊感爹c亟攉 2011,27(24):98-102 ChineseAm-iculturalScienceBulletin 从干种子中快速获取高质量DNA的高盐提取方法 张富丽 ,陶 李 ,佟洪金 ,刘 勇 ,宋 君 ,尹 全 ,李 忆 ,代晓航 ,雷绍荣 ,游米沙 (四川省农业科学院分析测试中心,成都610066;四川省环境保护科学研究院,成都610064; 四川省农业科学院植保所,成都610066;四川民族学院,四川康定626001) 摘 要:为寻求一种从植物干种子中简单快速提取高质量基因组DNA的有效方法进行本研究。将种子 打磨成粉 ,取 100mg粉末加入高盐提取液抽提基因组DNA。采用超微量分光光度计检测、PCR及酶切 的方法检验DNA的得率和质量。从 100mg7种常见作物种子粉末中可以得到619.67~1811.21ng基因 组DNA,A26o/:。比值在 1.87~2.07之间,其纯度和质量适合进行PCRTL酶切分析。通过普通PCR方法 分别对7种作物的特异性 内源基因片段进行扩增,结果均能扩增到明显的 目的条带。用EcoRV和 HindlII两种核酸 内切酶能对所得的DNA充分酶切。结果表明本方法能快速地从干种子中提取到高质 量的DNA。 关键词:基因组DNA;聚合链式反应 ;高盐提取;干种子 中图分类号:Q812 文献标志码:A 论文编号:2011—1268 AMethodofSimpleandRapidSalt-extractionofHighQualityGenomicDNAfromPlantSeeds ZhangFuli,TaoLi,TongHongjin,LiuYong,SongJun,YinQuan,LiYi, DaiXiaohang,LeiShaorong,YouMisha (AnalysisandDeterminationCenter,SichuanAcademyofAgricuhuralSciences,Chengdu610066; 2SichuanResearchAcademyofEnvironmentalProtectionScience,Chengdu610064; PlantProtectionResearchInstitute,SichuanAcademyofAgricuhuralSciences,Chengdu610066; SichuanUniversityforNationalities,KangdingSichuan626001) Abstract:Tofindanew simple,fastandhighqualitygenomicDNA extractiontechniquefrom driedseeds,this experimentwascarriedout.Theseedsweregroundtopowder.100mgpowderofseedswasputinaneppendoff tubeandthegenomicDNA wasextractedbyourmethod,respectively.Thefinaleluatewasdetectedby ultramicroUV/Visspectrophotometer.ThepurityandqualityofthegenomicDNA extractedwasconfirmedby PCR andenzymedigestionanalysis.619.67to1811.21ngofgenomicDNAwasextractedrfom 100mgdried seedsforallindividualssampled,andtheA260/A280ratioofDNAsampleswasrfom 1.87to2.07.Thepurityand qualityofthegenomicDNA solutioncouldbeconsideredSOhighthatitwassufficientofrenzymedigestio

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