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134 Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, February 2011, Vol. 25, No.2
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雌激素对人表皮干细胞增殖与迁移影响的体外实验
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陈小波 程飚 刘宏伟 孙同柱 付小兵
【摘 要】 目的 表皮干细胞（epidermal stem cells，ESCs ）在体内的微环境十分复杂，雌激素可能是主要的参与
者。探讨雌激素对体外培养的hESCs 增殖与迁移的影响。 方法 取自愿捐赠的正常人包皮标本，采用密度梯度离心法
分离培养hESCs ，并传至第2 代。流式细胞仪检测第2 代hESCs 整合素β 、细胞角蛋白19 （cytokeratin 19，CK19 ）、CK14
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和CK10 抗原表达以鉴定hESCs 。取第2 代hESCs 2 × 106 个分别用含0.1 nmol/L 雌激素的ESCs 专用培养基（A 组）、含
10 nmol/L 雌激素受体阻断剂的ESCs 专用培养基（B 组）以及普通ESCs 专用培养基（C 组）进行培养；于培养后24 h 刮
擦生长融合成片的hESCs ，制备宽度为100 μm 的体外单层hESCs 损伤模型。于模型制备后24 、48 、72 h ，倒置相差显微
镜下观察各组表皮创面愈合情况（即hESCs 迁移情况），并计算模型制备后72 h 各组创面愈合率；于模型制备后24 、48 、
72、96、120 h ，采用MTT 法检测hESCs 分裂增殖活性。 结果 原代培养的hESCs 贴壁呈单层卵圆形、集落样生长。流
式细胞仪检测第2 代hESCs 的整合素β 、CK19、CK14 呈阳性标记，阳性率分别为96.63%、95.47%、94.27% ；CK10 呈阴
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性标记，阳性率为1.32%。模型制备后24 、48 、72 h ，各组均可见hESCs 迁移越过创缘，其中A 组越过创缘的细胞数多于B 、
C 组，C 组多于B 组；模型制备后72 h，A 、B 、C 组创面愈合率分别为69.00% ± 0.05%、35.00% ± 0.05%、48.00% ± 0.06% ，
组间比较差异均有统计学意义（P 0.05 ）。模型制备后24 、48 、72、96 和120 h，A 组hESCs 分裂增殖活性高于B 、C 组，
C 组高于B 组，差异均有统计学意义（P 0.01 ）。 结论 雌激素具有促进hESCs 分裂增殖和迁移的作用，并藉此可能参
与皮肤诸多的生物学作用。
【关键词】 人表皮干细胞 雌激素 细胞增殖 细胞迁移 体外实验
EFFECTS OF ESTROGEN ON PROLIFERATION AND MIGRATION OF HUMAN EPIDERMAL STEM CELLS IN
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VITRO/CHEN Xiaobo , CHENG Biao , LIU Hongwei , SUN Tongzhu , FU Xiaobing . Department of Plastic Surgery, Guangzhou
General Hospital of Guangzhou Military Region, Guangzhou Guangdong, 510010, P.R.China; 2Department of Plastic
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