周期素G2调控Wnt信号通路及抑制细胞增殖的研究.pdfVIP

致谢…………………………………………………．．45 个人简介………………………………………………．46 t信号通路及抑制 的研究 ．-_IL_。 目 细胞周期是细胞生命活动的基本过程，其调控过程是调节细胞增殖的核心环 节。一般认为细胞周期素(cyclin)的周期性表达、周期素结合并激活相应的细 kinease，CDK)对细胞周期进展起正性 胞周期素依赖性激酶(cyclin．dependent kinease 驱动作用；而细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclin．dependent 素、CDK和CKI多因素相互协同，共同影响细胞周期进程。细胞周期调控与细胞 癌变关系十分密切，对细胞周期调控的研究将有助于阐明肿瘤的发生机制。 G2基因(CCNG2)编码，N端有典型 周期素G2由定位于4q21．1的cyclin box)序列，C端含有与降解有关的 的介导CDK结合相关的周期蛋白框(cyclin PEST基序(PEST motif)。周期素G2在小脑、胸腺、脾、前列腺和肾脏中表达 较高。在细胞中，周期素G2的mRNA表达水平随细胞周期波动，在S期晚期达 到最高，而在G2／M期转换时开始降低。本课题组前期研究发现周期素G2在口 腔鳞癌中表达明显低于正常口腔黏膜组织，过表达周期素G2能够在体外抑制肿 瘤细胞的克隆形成能力，表明周期素G2的作用不同于其他周期素，是调控细胞 周期和细胞增殖的负性因子。最近国外一些研究表明周期素G2是一种核质穿梭 2A，PP2A)结合；有学者 蛋白，能够与蛋白质磷酸酶2A(proteinphosphatase amino．terminal 通过基因芯片和小分子抑制剂研究，发现JNK(c．Jun kinase)信 of 号通路和mTOR(mammalian target 达，但目前对于周期素G2负性调控细胞周期和细胞增殖的作用机制尚不清楚。 ．为了进一步分析周期素G2负性调控细胞周期和抑制细胞增殖的作用机制， 本课题组前期通过酵母双杂交技术筛选周期素G2的结合蛋白，找到35个非重 复阳性克隆。通过对出现频率较高的几个蛋白进行序列比对和生物信息学分析， 路)对细胞周期和增殖起调节作用。经典Wnt信号通路在生物进化过程中极为 保守，在细胞分化、细胞增殖及胚胎的生长发育过程中起重要调控作用。当细胞 外Wnt信号分子与细胞膜上特异性受体Frizzled蛋白结合后激活胞内的 Dishevelled蛋白，使糖原合成激酶-3B(glycogensynthasekinase，GSK．313)丧失 续累积增多，当其浓度达到一定水平时就可以向细胞核内转移。在细胞核中，B． enhancerfactor， catenin与TCF／LEF转录因子家族(T．cell factor／lymphoid 等经典Writ信号通路的下游靶基因，进而调控细胞周期进程并发挥生物学效 应。 本课题拟在前期发现周期素G2抑制细胞克隆形成能力和在肿瘤细胞中低表 达的基础上，进一步研究周期素G2对细胞增殖和细胞周期进程的调节作用。并 在前期结果提示周期素G2可能参与经典Writ信号通路调节过程的基础上，深入 分析和验证周期素G2对经典Wnt信号通路的调控作用和分子机制，丰富