黄鳝皮肤黏液抗菌肽分离纯化及其部分特性研究.pdfVIP

第 32卷 第 2期 渔 业 科 学 进 展 Vo1．32，NO．2 2 0 1 1 年 4月 PROGRESSIN FISHERY SCIENCES Apr．，2011 黄鳝皮肤黏液抗菌肽 的分离纯化及其部分特性研究 李联泰 安贤惠 胡 江 许 宁 张晓磊 王 静 (淮海工学院 江苏省海洋资源开发研究院，连云港 222005) 摘 要 以黄鳝皮肤黏液为材料 ，通过 SephadexG一50凝胶层析和 DEAESepharoseFastFlow 离 子交换层析 ，分 离纯化 了具有抗菌和镇痛活性的多肽 MAS一Ⅳ一4，用Tricine—SDS—PAGE测得其分子 量为 10．4kD，用显微熔点仪测得其熔点为 208～211℃。用抑茵 圈法测定其抑 菌活性 ，结果表 明， MAS—lV一4对嗜水气单胞菌、金黄 色葡萄球 菌、枯草芽孢杆菌有较 强的抑 菌效果。此外，每 只注射 0．75ml以上的 MAS一Ⅳ 4样品液能显著提 高小 白鼠的痛阈值 。MASⅣ 4还具有微 弱的溶血活性 和丝氨酸蛋 白酶抑制活性 。 关键词 黄鳝 皮肤黏液 抗菌肽 痛阈值 溶血活性 中图分类号 $942．1 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2011)02—0027—07 Isolation，purification andpartialcharacterization ofanti-bacteria peptidefrom theskin mucusofM onopterusalbus LILian-tai AN Xian-hui HU Jiang XU Ning ZHANG Xiao-lei WANG Jing (HuaihaiInstituteofTechnology，JiangsuMarineResourcesDevelopmentResearchInstitute，Iianyungang222005) ABSTRACT Ananti—bacterialandanalgesicbioactivepeptidenamedMAS—IV一4wasisolated from theskinmucusofM ．albusandpurifiedbySephadexG一50gelchromatographyandDEAE SepharoseFastFlow ionexchangechromatography．ThemolecularweightofMAS一Ⅳ一4wases— timatedbyTricine—SDS—PAGE as10．4kD，and itsmeltingpointwasmeasuredbymicroscopic meltingpointmeteras208～211℃ ．TheantibacteriaactivityofM AS—IV一4wasassessedbyde— terminationoftheinhibitionzone．TheresultsshowedthatthegrowthofAeromonashydrop— nila，S￡以 厶 0fDff aureusandBacillussubtiliswasstronglyinhibitedbyMAS—IV一4．Inaddi— tion．thepain thresholdofthemicewassignificantlyincreasedwhen0．75mlormoreofM AS一 Ⅳ一4wereinjected．MAS—VI一4alsodemonstratedweakhemolyticactivityandserineproteasein— hibitingactivity． KEY W ORDS M onopterusalbus Skinmucus Anti—bacteriapeptide Pain threshold H emolyticactivity 在动物体 内，作为先天免疫最终效应物之一 的抗菌肽 (Antimicrobialpeptides，AMPs)，