CADM1过表达对人胃癌MKN-45细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制.pdfVIP

生旦痘理生堡 壹 ! 』 0fPath叩hysi010g)r2012，28(12)：2283—2287 · 2283 · [文章编号] 1000—4718(2012)12—2283—05 CADM1过表达对人 胃癌 MKN一45细胞 增殖和侵袭的影响及其分子机制 郭晓鹤 ， 张彩凤 ，夏永华 ， 李贞娟 ， 周慧聪 ，韩 宇 (新乡医学院第一附属医院 消化科 ，皮肤科，河南 新乡453100) [摘 要] 目的：研究细胞黏附分子 1(celladhesionmolecule1，CADM1)过表达对人 胃癌MKN一45细胞增殖 和侵袭的影响并探讨其可能的分子机制。方法：采用 Westernblotting检测3株胃癌细胞系中CADM1蛋白的表达。 构建pcDNA—CADM1真核表达载体，并将其转染MKN一45细胞，采用G418筛选稳定表达CADM1的细胞株，利用 Westemblotting鉴定所筛选的稳定细胞株。采用CCK一8试剂和 Boyden小室分析过表达 CADM1对 MKN一45细 胞增殖和侵袭的影响。利用Westernblotting检测细胞增殖和侵袭相关蛋白表达。结果：MKN一45细胞中CADM1 蛋白的相对表达水平显著低于MKN一28和SGC一7901细胞(P0．05)。此外，成功构建 pcDNA—CADM1真核表 达载体 ，并获得稳定过表达CADM1的MKN一45细胞株。CCK一8结果显示，与未处理组和pcDNA3．1组相比， pcDNA—CADM1组中MKN-45细胞的增殖明显受到抑制(P0．05)。Boyden小室体外侵袭实验结果显示，与未 处理组(101．53±6．89)和pcDNA3．1组(98．77±7．03)相比，pcDNA—CADM1组中MKN一45细胞穿膜的细胞数 (52．35±3．89)显著减少(P0．05)。Westernblotting结果显示，与未处理组和pcDNA3．1组相比，pcDNA—CADM1 组中p21蛋白表达显著上调，而MMP一2和MMP一9表达显著下调(P0．05)。结论：CADM1过表达能明显抑制 胃癌细胞的增殖和侵袭能力，因而CADM1有望成为胃癌治疗的新靶点。 [关键词] 胃肿瘤；细胞黏附分子 1；细胞增殖；细胞侵袭 [中图分类号】 R735．2 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．12．032 Effects0fCADM 10verexpressi0nonproliferationandinvasionofhuman gastriccarcinomacelllineMKN 一45 GUOXiao—he，ZHANGCai—feng，XIAYong—hua，LIZhen—juan，ZHOUHui— cong ．HAN Y11 (DepartmentofGastroenterology，DepartmentofDermatoloyg，theFirstAffiliatedHospitalofXinxiangMedicalUnweni@， Xinxiang453100，China．E—mail：zhangcafieng666@163．con) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofCADM1overexpressiononproliferationandinvasionofhuman gastriccarcinomacelllineMKN一45．METHODS：TheproteinlevelsofCADM 1in3humangastriccarcinomacelllines weredetectedbyWestern blotting．EukaryotieexpressionvectorpcDNA —CADM1wasconstructednadtrnasfected into MKN一45cells．TheMKN一45cellsstablyexpressingCADM1wereselectedbyG418na