海洋微藻的无菌化处理及对其生长特性和生化组成的影响.pdfVIP

第 34卷 第 6期 海 洋 学 报 Vol-34．No．6 2012年 11月 ACTA OCEANOLOGICA SINICA 海洋微藻的无菌化处理及对其生长特性 和生化组成的影响 周文俊 ，郑立 ，郑明刚 ，高伟 ，崔志松 ，徐鲁燕 (1．国家海洋局 第一海洋研究所，海洋生态研究中心，山东 青岛266061) 摘要：利用常用抗生素(氨苄青霉素、链霉素、氯霉素和卡那霉素)对 4株海洋微藻(1株金藻和 3 株小球藻)进行了无菌化处理，并对这 4株微藻在带菌和无菌培养时的生长特征和生化组成进 行 了比较。结果表 明：中高浓度 (≥100rag／dni。)的单种抗生素或抗生素组合可抑制微藻的生 长 ，个别低浓度 (50rag／dni。)的抗生素或抗生素组合可促进微藻的生长；氨苄青霉素 、链霉素和 卡那霉素各 200mg／dm。联合使用处理球等鞭金藻，氯霉素 100，50，50mg／dm。单独使用分别 处理小球藻C95，CV和C146，可获得这4株微藻的无菌藻系；无菌培养的4株海洋微藻的稳定 期持续时间由除菌前的4～5d延长到15～20d，藻液悬浮性增强，藻细胞不易老化 ；除菌后微藻 的主要生化成分发生 明显变化，球等鞭金藻的叶绿素A、叶黄素和总脂含量显著增加，小球藻 C95和CV 的总蛋 白含量显著增加 ，3株小球藻的脂肪酸组成如 EPA，PUFA等的含量发生显著 变化。 关键词 ：微藻；无菌化；抗生素；生长特征 ；生化组成 中图分类号 ：Q943．5 文献标志码 ：A 文章编号 ：0253-4193(2012)06—0177—10 言，物理方法难以获得完全无菌的藻系E6--7]。由于 1 引言 抗生素可抑制细菌 的生长和繁殖 ，在除菌方面显示 海洋微藻因其富含 DHA、EPA等活性物质而 出强大的作用 ]，利用微藻比杂菌具有更强的抗生 被应用于保健品、化妆 品、食 品等 的开发 ，然而其生 素耐受性，选择性地使用一种或多种抗生素进行无 物量一直是限制其低成本开发利用的瓶颈。有研究 菌处理则较容易获得无菌藻系E9-13]。但抗生素的 发现，利用微藻的异养化培养技术可实现微藻活性 使用也会对微藻的生长速率、藻细胞密度以及 叶绿 成分和生物量的双重增加_1]。但 由于存在于藻液 素含量产生影响口 ¨]，除菌后经传代培养消除抗生 或附着在藻体上的共生菌可促使微藻细胞老化和下 素影响的藻株与带菌藻株相比在生理特征方面也有 沉附底_l5]，并可能利用异养培养时添加 的有机碳源 所不同[1。本文利用 4种常用抗生素对 4株海洋 进行大量繁殖 ，从而限制微藻 的生长繁殖 ，导致无法 微藻进行 了无菌化处理 ，比较了无菌藻株与 自然带 对其进行异养培养。因此，如何获得无菌藻系成为 菌藻株在生长特征 、叶绿素 A、叶黄素、总蛋 白和总 微藻异养研究首要解决的问题。 脂含量以及脂肪酸组成等方面 的差别 ，为微藻无菌 微藻的无菌化处理主要有物理方法如稀释涂布 系的建立并对其进行异养培养以更有效地开发微藻 法、射线辐照法等和化学方法如抗生素法。一般而 资源打下基础 。 收稿 日期 ：201l-O8—10；修订 日期 ：2012-06—15。 基金项 目：海洋公益性行业专项项 目“海洋微藻制备生物柴油的规模化开发利用技术研究”(200805039)；国家 自然科学基金 30870247)；青岛市科技发展技术(08—1—3—10一JcH)；海洋可再生能源资金项 目(GHME2001SW02) 作者简介：周文俊 (1987一)