甜叶菊NaN3离体诱变技术体系的建立.pdfVIP

ChineseJournalofTropicalCrops 甜叶菊NaN3离体诱变技术体系的建立 何克勤，胡能兵，吴海东，姚军伟，徐礼森 ，崔广荣 安徽科技学院植物科学学院．安徽凤阳 233100 摘 要 采用NaN对甜叶菊离体培养的茎段进行诱变处理。通过对各处理下的再生苗进行 SRAP检测，建立其 离体诱变技术体系。结果显示 ，较低浓度的NaN(3mg／L)诱变处理对再生苗伤害较小 ，随着诱变浓度的增加 (37mgL／)，茎段死亡率也逐渐增加；SRAP分子检测发现 ，再生苗的DNA序列发生了不同程度的多态性变化， 最高多态性比率为 54．2％(3mg／L处理 20d)。结果表明，较合适NaN离体诱变技术体系为 3mg／L处理 20d。 关键词 甜叶菊；离体培养；诱变：SRAP 中图分类号 $682 文献标识码 A EstablishmentoftheTechniqueSystem ofin vitroMutation InductebyNaN3forStevia rebaudianaBertoni HE Keqin，HU Nenghing，WU Haidong，YAO Junwei，XU Lisen，CUIGuangrong CollegeofPlantScience，AnhniSceinceandTechnologyUniversity,Fengyang,Anhtd233100，China Abstract ThestemsofSteviarebaudianaBertoniwereusedastheexplantsfor vitromutationinductedbyNaN and thesystem ofmutation in vitrowasestablishedby investigating thenew plantletswith SRAP technology．The resultsindicatedthat，littleharm appearedinthestemsbylowconcentrationofNaN3(3rag／L)，andthedeathrate ofstemswasimpmvedwiththeincreaseofNaN3concentration(3-7mg／L)．Meanwhile，DNAsequenceofregenerated plantletswaschangedbySRAPanalysis．withthehighestmutationratioof54-2％ inthetreatmentof3mg／L NaN3ofr20days．Basedon theresults．hteoptimalsystem formumfionwasstemsofS rebaud／ana treatedby 3mg／L ofNaN3ofr20days． Keywords rebaudianaBertoni；Culture in vti~；Mutation；SRAP doi 10．3969~．issn．1000—2561．2012．11．020 甜叶菊 (SteviarebaudianaBertoni)又名甜菊 、 间对茎段伤害和成苗的影响．用 SRAP分析标记技 甜茶 。是菊科草本植物，原产巴拉圭一带。我国于 术对再生植株多态性的检测 ，旨在建立NaN 离体 20世纪80年代初引种栽培成功l【1甜叶菊叶片中含 诱变技术体系．为甜叶菊诱变育种及获得 良好性状 有甜度是蔗糖 300倍以上的甜菊糖苷 ．目前在世界 的突变株奠定基础。 各 国的医药、饮料、食品等行业 中得到广泛应用， 被称为是最有开发价值和前途的健康新糖源[2_31 1 材料与方法 甜叶菊为异花授粉植物 ．其基因型多为杂合， 1．1 材料 遗传性状也不够稳定．加上种子存在体积小、活力 lI1．1 供试材料 甜叶菊外植体为 “皖甜 1号一18” 低、易带菌等缺点．难 以用常规的育种方法保存或 组织培