急性淋巴细胞白血病微小残留病追踪检测的新方法-中华儿科杂志.pdfVIP

6·94 · Chin J Pediatr , November 1998 , Vol 36 , No. 11 · · 新技术 急性淋巴细胞白血病微小残留病追踪检测的新方法 肖燕 　费洪宝 　梁欣荃 　金润铭 　杨爱德 ( ) μ 2MRD 的追踪检测:对 20 例急淋患 　　急性淋巴细胞白血病 ALL , 急淋 因组DNA 1 g 。共30 个循环。 经治疗达到完全缓解后 ,复发的根源在 4 体外转录 : PCR 阳性产物经蛋白 者的检测发现 ,15 例可见到预计大小的 ( ) 酶 K 消化 , 苯酚抽提 ,无水乙醇沉淀后 γ 于体内微小残留病 MRD 的存在。动态 被保护片段 , 故本组资料 TCR 单克隆 检测体内 MRD ,对于指导临床治疗和预 ( ) 重排基因的发生率为 75 % ,检测诱导缓 重溶于等体积 TE 中备用。取每个反应 防白血病复发具有重要意义。为了使急 体系的 PCR 产物 6 μ 解治疗后 0. 5 ～2 个月的标本共 13 份 , l 进行体外转录。 性淋巴细胞白血病 MRD 的检测在达到 μ 转录反应体系 50 l , 为防止转录本被 全部阳性 ;3～4 个月标本 10 份 ,7 份阳 灵敏和特异的同时 ,又能快速、经济和方 RNA 酶降解 ,反应体系中加入 RNA 酶抑 性 ;5 个月以上标本 6 份 ,1 份阳性。 便 ,作者建立了一种以 T 细胞抗原受体 制剂。转录后 ,模板DNA 用无 RNA 酶的 讨论 : 目前认为急淋白血病是一组 γ ( γ) 链 TCR 重排基因为标志 ,RNA 酶保 DNA 酶 I 消化。 异质性疾病 ,缺乏肿瘤特异性的基因标 护法与硝酸银染色相结合的新的非同位 5RNA 转录本分子杂交和 RNA 酶 志。但由于其同时又具有单克隆特性 , 素方法 ,现报告如下。 μ 消化 :探针 RNA 与待测 RNA 在 40 l 体 因此现在多采用免疫球蛋白重链基因 材料及方法 : 1 细胞系及临床标 系中以 1 ∶1 的比例杂交。杂交完成后 , ( ) IgH 和 TCR 基因重排作为克隆标志来 本 :细胞系 Sup B 来自 1 例普通型急性 为消化不配对核苷酸 ,于反应体系中加 检测 MRD 。由于 IgH 基因重排在病程中 7 ( )