青枯雷尔氏菌的脂肪酸多态性研究及其在种下分类上的应用.docVIP

青枯雷尔氏菌的脂肪酸多态性研究及其在种下分类上的应用 摘要：对40株青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)全细胞脂肪酸进行了气相色谱分析，测出其含量最高的三种脂肪酸是7—十六碳烯酸(21%~34%),十六烷酸(21%~32%)和7—十八碳烯酸(12%~23%)。利用LGS软件对40株青枯雷尔氏菌全细胞脂肪酸色谱结果进行聚类分析，聚成三类：亚种Ⅰ、亚种Ⅱ和亚种Ⅲ。亚种Ⅰ为无致病性菌株，亚种Ⅲ为强致病性菌株，亚种Ⅱ为过渡性菌株。细菌全细胞脂肪酸种类和含量与其致病性之间存在着明显的相关性。细菌全细胞脂肪酸的种类和含量可以作为细菌化学分类法的依据。 关键词：青枯雷尔氏菌；脂肪酸；气相色谱；亚种 Study on Polymorphism of Fatty Acid from Ralstonia solanacearum and Its Classificatory Application on Subspecies Abstract: Whole-cell fatty acids of 40 Ralstonia solanacearum were analyzed by using gas chromatography. The results showed that C16:1Δ7(21%~34%),C16:0(21%~32%) and C18:1Δ7(12%~23%) were the most plentiful fatty acids in the bacterium. Clustered the results of gas chromatogram analysis on the whole-cell fatty acid from 40 Ralstonia solanacearum by LGS software, three strains were present: subspecies Ⅰ (avirulent strain), subspecies Ⅱ (transition-virulent strain) and subspecies Ⅲ (virulent strain). There was an obvious relativity between the virulence of the bacterium and the kinds and quantity of whole-cell fatty acids, which can be used as an index for chemistry taxonomy of bacteria. Key words: Ralstonia solanacearum; fatty acid; gas chromatogram; subspecies 脂肪酸是生物体的基本结构成分之一，在细胞中绝大部分脂肪酸以结合形式存在，构成具有重要生理功能的脂类，它是构成生物膜的重要物质；是机体代谢所需燃料的贮存形式；作为细胞表面物质与细胞识别、种族特异性和细胞免疫等有密切关系；具有生物活性的某些维生素和激素，也是脂类物质。 细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌引起的毁灭性土传病害。青枯雷尔氏菌可危害几百种植物，造成农林业生产巨大经济损失[1]。青枯雷尔氏菌菌株种类很多，在寄主范围、地理分布、致病特征、流行特征、种下分化等方面存在较大的差异，具有明显的多态性[2]。青枯雷尔氏菌的种下分化复杂，鉴定方法主要从生理方面、生化型、血清型、溶源型、致病型、基因型等等方面研究。脂肪酸是微生物细胞组分中一种稳定而富有的重要成分，它和细菌的遗传变异、毒力、耐药性等有极为密切的关系[3]。现代微生物学研究表明：细菌的细胞结构中普遍含有的脂肪酸成分与细菌的DNA具有高度的同源性，各种细菌具有其特征性的细胞脂肪酸指纹图谱[4]。因此，可以把脂肪酸的种类和含量作为化学分类法的依据，对青枯雷尔氏菌进行种下分类。应用气相色谱技术快速、灵敏、准确的检出细菌细胞内的脂肪酸，并可通过计算机的运用而使分类达到数据化、自动化。本文对41株青枯雷尔氏菌全细胞脂肪酸含量进行了气相色谱分析，并从脂肪酸含量方面对其种下分类（亚种）进行了初步的探讨。 1.材料与方法 1.1 材料 1.1.1 供试菌株：由福建农科院生物技术研究中心菌种库提供，共40株 1.1.2 仪器：气相色谱系统采用的是美国Agilent 6890型（Agilent Chromatograph: GC），包括全自动进样装置、石英毛细管柱及氢火焰离子化检测器；分析软件应用美国MIDI公司开发的基于细菌细胞脂肪酸成分鉴定细菌的软件MIS4.5（Microbial Identification System）和 LGS4.5（Libra