产低温脂肪酶深海菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究.pdfVIP

‘u l‘十 ll门 飙 鞲瓣 司 释 勰 第 33卷第 11期 FoodResearchAndDevelopment 生物工程 l8o 产低温脂肪酶深海菌株的筛选、 鉴定及酶学性质研究 王全富 ．一，侯艳华 ·，蔺一飞 ，李富超 (1．哈尔滨工业大学化工学院，黑龙江 哈尔滨 150001；2．哈尔滨工业大学海洋学院，山东威海 264209； 3．中国科学院海洋研究所 实验海洋生物学开放研究实验室，山东 青岛266071) 摘 要：从鄂霍次克海域沉积物样品(1v39—06—06—04～18H)分离得到的 150株低温细菌中筛选到菌株 130产脂肪酶 活性最高，其活性达到42U／mL。对该菌株进行 16SrRNA基因序列同源性和系统发育分析，结果表明菌株 130属于 芽孢杆菌属(Bacillus)。对其分泌脂肪酶的部分酶活特性进行研究，结果表明：酶的最适作用温度为 35℃，0℃时保持 33％的相对酶活力；对热敏感，60℃处理 10rain仅残留30％酶活性 ；酶的最适pH范围在 6．0~70。 关键词：深海微生物；低温脂肪酶；16SrRNA；酶学性质 ScreeningandClassificationofDeep-seaM icrobesProducingLow-temperatureLipaseand Characterizati0noftheLipase WANGOuan—fu-一，H0UYan—hua，．LINYi—fei，LIFu—chao (1．HarbinInstituteofTechnology，SchoolofChemicalEngineering，Harbin150001，Heilongjiang，China； 2．HarbinInstituteofTechnology，SchoolofOcean，W eihai264209，Shandong，China；3．ChineseAcademy ofSciences，InstituteofOceanology，Qingdao266071，Shandong，China) Abstract：Low-temperaturelipaseproducingbacterialstrain130wasscreenedfrom 150isolatesfrom Okhotsk Seasedimentssamples (1v39-06-06-04-18H)，anditsactivityreached42U／mL．The16SrRNAgene sequenceshomoloyg andphylogeneticanalysisshowedthatstrain130belongedtothegenusBacillus．Thelipase characteristichadbeenstudied，andtheresultshowedthattheoptimaltemperatureoftheactionofthislipase was35oCandabout33％ oftheoptimum activitywasstilldetectableat0oC．Theenzymewasthermallability． only30 ％ ofitsactivitywasremainedafter10rainincubationat60℃ ．Theenzymeshowedhighlipolytic activityfrompH 6．0to7．0． Keywords：microbesindeepsea；low-temperaturelipase；16SrRNA；enzymecharacteristics 基金项 目：国家自然科学基金；山东省 自然科学~ (ZR2009DQ023，ZR20I1CMO