Rubisco酶研究进展.docVIP

Rubisco酶的研究进展 学生：周宏伟 学号：03241 导师：顾蕴洁教授 王忠教授 扬州大学农学院农学系 225009 摘要：核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶/加氧酶（简称Rubisco）催化卡尔文循环中最初的CO2固定，使核酮糖-1，5-二磷酸（RuBp）与CO2形成两分子3-磷酸甘油酸。该酶也同时催化光呼吸作用中的第一个步骤，使RuBp与O2反应产生一分子磷酸甘油酸和一分子磷酸乙醇酸。因此Rubisco处于光合碳还原和光合碳氧化两个方向相反但又相互连锁的循环的交叉点上，它对净光合速率起着决定性的影响。它的提取与纯化是对它进行进一步研究的重要工作，这个过程影响了研究的可靠性。 关键词：Rubisco酶 结构 功能 提纯 鉴定 Rubisco（1,5-二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶）是光合碳代谢中的关键酶，处于光合碳还原和光合碳氧化这两个方向相反但又相互连锁的循环的交叉点上，调节着光合作用和光呼吸的代谢比例，其活性大小对光合速率起着决定性作用。 Rubisco首先由Wildman和Bonner于1947年从菠菜叶中作为一种可溶性大分子蛋白质被发现，当时称为“分部Ⅰ蛋白（fraction I protein）”。后来碳同化研究发现分部Ⅰ蛋白就是催化光合作用中CO2固定的RuBP羧化酶；1971年发现“RuBP羧化酶”是一个双功能酶，它还能催化RuBP的氧化作用。此后该酶就被称为核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶，简称Rubisco如图（1）： Rubisco存在于叶绿体间质中，占叶片可溶性蛋白的50%以上。该酶催化光合作用的CO2固定的第一步反应使CO2和二磷酸核酮糖转变成两个分子的3-磷酸甘油酸;同时也催化光呼吸过程的第一步反应，即催化O2 和RUBp产生一分子磷酸酸甘油酸和一分子磷酸乙醇酸。因此该酶是调节光合和光呼吸，从而决定净光合的一个关键酶。此外，Rubisco是植物可溶性蛋白中含量最高的蛋白质，占50%左右，它是植物体内的一种重要的储藏蛋白。因此， Rubisco的研究无论在理论上还是实际上都具有重要的意义。本文就近年来有关研究进展作一介绍. 1 Rubisco结构、功能及其影响因素 1.1 Rubisco蛋白质结构 所有真核和大多数原核的光合有机体中的Rubisco由8个大亚基和8个小亚基组成，大亚基一般由475个氨基酸残基组成，不同来源的Rubisco大亚基序列有80%以上的同源性，而且特别是在169—220和321—340之间的氨基酸残基序列，在不同有机体中几乎完全一致，现在已知这些区域含有与催化及活化过程有关的氨基酸残基。大多数Rubisco小亚基由123个氨基酸残基组成，不同植物间小亚基氨基酸序列的同源性比大亚基低得多，一般在70%左右，然而，小亚基序列中有两个区域非常保守，即残基10—21和61—67，暗示这些部分可能有什么重要功能。 自然界中有两种类型的Rubisco，分别介绍如下： 1.1.1 Rubisco类型I 此类型的Rubisco由8个大亚基和8个小亚基组成，广泛存在于所有真核和大多数原核的光合有机体中，大亚基一般由475个氨基酸残基组成，它们的序列大多是通过核苷酸序列而推测所得的。大多数Rubisco小亚基由123个氨基酸残基组成。 1.1.2 Rubisco类型Ⅱ 类型ⅡRubisco仅由2个大亚基构成，存在于一种紫色非硫光合细菌深红红螺菌（Rhodospirillum rubtnm）中。虽然类型ⅡRubisco不含有小亚基，但它同样像类型I Rubisco一样催化RuBP的羧化和氧化两个反应。 1.2 亚基间的相互作用 实验结果表明，亚基之间存在着疏水作用，而大亚基之间的疏水作用比大小亚基之间的疏水作用要强，因此在接近等电点的偏酸性条件之下，Rubisco解离为大亚基核L8和游离小亚基，同时失去酶活性。 1.3 Rubisco酶活性的影响因子 1.3.1 Rubisco活化酶 植物体内Rubisco只有经过活化后才具有催化能力，这一活化过程是Rubisco的氨甲酰化，即Rubisco活性区的Lys残基与二价金属离子键合。这种氨甲酰化过程受很多因子调节，如BuBP、CAI P和某些 RuBP羧化反应的副产物．同时，活化酶可调节Rubisco活化，这种活化酶影响氨甲酰化的Rubisco催化转向比率以及Rubisco氨甲酰化状态，其作用机制还不情楚。但己证实该酶调节某些阻碍Rubisco氨甲酰化或催化抑制因子的释放而维持 Rubisco活力．翁小燕等研究生育期剑叶Rubisco活力在水稻抽穗开花时达到最大值，随后剑叶逐渐衰老， Rubisco活力也随之下降，从而证实了叶片光合功能下降与Rubisco活力下降密切相关，结果同样证实了Rubisco活化酶对Rubisco活性的影响 1.3.