不同纯化兔抗苏丹红ⅠIgG方法的比较.pdfVIP

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2017-09-12 发布于江苏
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不同纯化兔抗苏丹红ⅠIgG方法的比较.pdf

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第3O卷第2期武汉工业学院学报 V0I_3ONo．2 2011年6月 Journal of Wuhan Polytechnic University Jun．2O11 文章编号：1009-4881(2011)02-0005-03 DOI：10．3969／j．issn．1009-4881．2011．02．002 不同纯化兔抗苏丹红 IIgG方法的比较张大川，付云洁，刘志国，梁莉甜，李琦 (武汉工业学院生物与制药工程学院，湖北武汉 430023) 摘要：采用辛酸-硫酸铵法和亲和层析法两种方法纯化兔抗苏丹红IIgG。纯化产物通过 BCA法、琼脂双向扩散、SDS．PAGE凝胶电泳试验进行蛋白浓度、效价及纯度的验证。实验结果表明，利用辛酸硫酸铵纯化的产物蛋白质浓度高于亲和层析法，但经亲和层析纯化的产物纯度和效价均优于饱和硫酸铵。因此亲和层析法是一种快速高效的纯化方法，纯化产物可适用于免疫学检测方法的研究，为今后食品中苏丹红添加剂的快速检测奠定了良好的基础。关键词：多克隆抗体；辛酸硫酸铵法；亲和层析法；BCA法；凝胶电泳中图分类号：R392．7 文献标识码：A J l ■ ● … ● ■ ● ■ ● ， … OmparISOnOtdInerentmetnOdStOrpUntvinq therabbitantibodyofSudan I IgG zHANGDa—chuan．FUYun-j ，HUzhi—guo，HANGLi—tian，12Qi (SchoolofBiotechnicandPharmaceuticalEn~neefing，Wuhna PolytechnicUniversity，Wuhna430023，China) Abstract：Tocomparetheeffectsofeaprylieacid-ammoniumsulfate(CA-AS)methodnadaffinitychromatography method forpurifyingtherabbitanti—Sudna IIsC．Thepurifiedproductsweretestedintheproteincontent，relative molecularweight，nadimmunetiterbyBCAmehtod，agragelprecipitation(AGP)assay，sodiumdodeeylsulfate polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS)．Theresultsshowthathteproteincontentofpurifiednatibodyby CA-ASishigherthna htatbytheaffiniyt chromatorgaphymethod ，buthtepuriytnadtiterwithaffiniyt ehromatogra- phymethod arebothhigherthanhtatwithASmethod．Therefore 。hteaffinitychromatorgaphymehtod isarapidnad efficientmehtod fornatibodypurification． epurifiedproductsraesuitableforhtestudyofimmunologytestmeht· od ，nadestablishabettergroundworkfortherapiddetectionforSudanIinfoodinhtefuture． Keywords：polyelonalnatibody；eaprylicacid-ammonimu sulfatemethod ；affmitychromatorgaphy；BCA mehtod ；gel electrophore