PTEN对子宫内膜癌细胞株迁移和侵袭能力的影响.pdfVIP

中国癌症杂志 2013年第23卷第10期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2013 Vol.23 No.10 813 PTEN对子宫内膜癌细胞株迁移和侵袭 能力的影响 1 1 2 1 1 1 李云云 　贺文凤 　黄婷婷 　申阳 　刘秀霞 　曹青 1. 南昌大学附属第二医院江西省医学分子重点实验室，江西 南昌，330006 ； 2. 江西省妇幼保健院产前诊断科，江西 南昌，330006 　　［摘要］　背景与目的： 10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10，PTEN)是较为常见的抑癌基因之一。多项研究表明，其在子宫内膜组 织中表达量降低，但是对子宫内膜细胞具体的功能及机制却不十分清楚。本研究旨在探讨PTEN对子宫内膜癌 HEC-1B细胞迁移及侵袭能力的影响及相关机制，为子宫内膜癌治疗提供新靶点。方法：运用基因重组技术构建 pIRES2-ZsGreen1-PTEN重组质粒；将重组质粒转染至子宫内膜癌HEC-1B细胞中，以转染pIRES2-ZsGreen1空载 质粒为对照；运用体外划痕、Transwell迁移及侵袭实验分别检测过表达PTEN后细胞迁移和侵袭能力的变化； 运用Western blot法检测过表达PTEN后细胞中PTEN、AKT、p-AKT及MMP-2蛋白表达量的变化。结果：PCR产物 凝胶电泳显示一条1.2 kb大小的条带，与PTEN cDNA大小符合；基因测序结果与Genbank中PTEN cDNA的序列一 致，表明质粒构建成功；转染后48 h荧光显微镜下见荧光且Western blot显示PTEN蛋白表达量增加，表明重组 质粒在HEC-1B细胞中表达成功；体外划痕及transwell迁移实验表明，过表达PTEN后HEC-1B细胞的迁移能力减 弱；体外侵袭实验显示，过表达PTEN后HEC-1B细胞的侵袭能力明显低于对照组及未处理组；Western blot结 果表明，过表达PTEN会降低HEC-1B细胞中p-AKT蛋白表达下降，但是AKT蛋白量却不受影响，同时p-AKT下游的 MMP-2蛋白表达量下降。结论：PTEN能明显抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞的迁移和侵袭，这一作用可能是通过抑 制AKT磷酸化，从而降低MMP-2蛋白的表达而实现的。 　　［关键词］　子宫内膜癌；肿瘤浸润；10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因；AKT；MMP-2 　　DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.10.006 　　中图分类号：R737.33 　　文献标志码：A　　文章编号：1007-3639(2013)10-0813-08 1 1 Effects of PTEN on the migration and invasion of endometrial carcinoma cells LI Yun-yun , HE Wen-feng , HUANG Ting-ting2 1 1 1 , SHEN Yang , LIU Xiu-xia , CAO Qing (1.The Key Laboratory of Molecular Medicine of Jiangxi Province, the Second