原发性肝癌检测HBVX蛋白的临床价值.pdfVIP

2013年2月 中国民康医学 Feb．2013 第25卷 下半月 第4期 MedicalJoumalofChinesePeoplesHealth Vo1．25 SHM No．4 【临床研究】 原发性肝癌检测 HBVX蛋 白的临床价值 贺立春 (吉林省肝胆病医院，吉林 长春 130062) 【摘要】 目的：研究原发性肝癌检测HBVX蛋白的临床价值。方法：采用聚合酶链反应(PCR)检测血清中乙型肝炎病毒X基因。结果： 100例原发性肝细胞癌(PHC)HBVX蛋白阳性51例(51％)，34例肝硬化 (Lc)HBVX蛋白阳性 12例(35．3％)，28例慢性肝炎 (CH)HBVX蛋 白阳性 7例 (25％)。47例 x蛋白阳性血清中HBV标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性40例(85．1％)，其中PHC患者 占28例(59．6％)、LC 患者占9例 (19．1％)、CH患者 占3例(6．3％)。HBV标志物均阴性的血清中，PHC患者 5O例 HBVX蛋白阳性 l9例 (38％)、Lc患者29例 HBVX蛋白阳性5例 (17．3％)、CH患者 11例HBVX心明眼亮 白阳性2例(18％)。在51例HBVX蛋白阳性原发性肝癌患者中，其中I期46 例 (91．2％)，Ⅱ期4例 (7．8％)，Ⅲ期 1例 (％)，Ⅳ期0例(O)，在46例HBVX蛋白阳性的原发性肝癌 I期患者中有 9例在影像学发现之前出 现。34例肝硬化 (LC)HBVX蛋白阳性 l2例 (35．3％)，28例慢性肝炎 (CH)HBVX蛋白阳性7例(25％)。经追踪调查，l2例 HBVX蛋白阳性 的肝硬化患者有4例发展为肝癌 ，7例 HBVX蛋 白阳性的慢性肝炎患者 中，有 2例发展为肝癌。结论：HBVX蛋 白是癌基因的启动因子，是导致 PHC发生 的主要原因。 【关键词】原发性肝癌；HBVX蛋白 doi：10．3969／j．issn．1672—0369．2013．04．O11 中图分类号： R735．7 文献标识码： A 文章编号 ： 1672—0369(2013)40—021—03 乙型肝炎(乙肝)病毒 X基因区编码的x(HB- 1 材料与方法 VX)蛋白可能是一种多功能调节蛋 白，通过影响肝 1．1 标本来源 已确诊的原发性肝癌患者 100例， 细胞增殖、细胞凋亡、细胞增殖节点调控、细胞分化 肝硬变患者34例，慢性肝炎患者28例。 以及受感染细胞对致癌物致突变因素的敏感性而发 1．2 仪器 自动荧光PCR分析仪，美国BIO—RND 挥其诱导细胞恶变的作用 。PCR技术既巧妙地利用 生产的荧光PCR扩增仪 。 了PCR技术核酸扩增的高效性、探针技术的高特异 1．3 HBV标志物检测试剂盒 厦门新创科技有限 性、光谱技术的高敏感性及计量高准确性等优点，又 公司。 克服了普通 PCR技术易污染、不能定量、探针杂交 1．4 方法 灵敏度不高、分离洗脱条件不易控制等不足，在疾病 1．4．1 引物、探针的设计、合成 上海生工生物工 的基因诊断中有广阔的应用前景。 程公司。 HBVX蛋 白的表达与 HBV病毒复制标志物 1．4．2 标本收集与 DNA的提取 样 品DNA提取 HBeAg有显著相关性，HBeAg阳性的乙肝患者 HB— 方法采用 PEG沉淀提取法，50仙l血清标本与 501xl VX蛋 白阳性数显著高于 HBeAg阴性的患者，x蛋 PEG沉淀剂充分混合，13000r／minXlOmin离心，弃 白直接影响着HBV或其它病毒的复制。x基因的 上清，沉淀物中加入 25txl裂解液打匀，煮沸 10min， 突变还可影响到HBV基因的表达，导致血清中不能 经 13O00r／min×10min离心后，取得 101xl上清作为 检出HBsAg、HBeAg。因此，即使 HBV标志物均阴 PCR增模板液。 性也要检测 x基因。PCR检测 HBVX蛋 白对原发 1．4．3