人抗Aβ42自身抗体的纯化及鉴定.pdfVIP

172 解剖学研究2011年第 33卷第 3期 AnatRes，2011，Vo1．33，No．3 · 论 著 · 人抗AI3 自身抗体的纯化及鉴定 段金海， 徐书雯， 莫建伟， 方运勇 (广东省医学科学院 广东省人民医院东病区神经内科 广东省老年医学研究所 广东省神经科学研究所，广东广州510080) 摘【要】 目的 纯化并鉴定正常人血清中抗A 自身抗体。方法 采集正常人血清标本，测定抗体含量，用饱和硫 酸铵沉淀血清得到 IgG粗品，用CNBrSephrose4B层析柱对粗品IgG进一步纯化，采用 PAGE电泳和Westernblot方法 鉴定 IgG纯度和免疫活性。结果 用 CNBr活化Sephrose4B柱可纯化出较高纯度的抗AB42自身抗体，纯度可达到90％。 结论 CNBr活化 Sephrose4B层析柱可有效地从人血清中纯化出较高纯度的抗 A 自身抗体 ，便于对 自身抗体进一步研 究．为AD的免疫治疗提供更多的信息。 【关键词】 老年性痴呆； p淀粉样蛋白； 自身抗体；纯化 Purificationandidentificationofanti-AI342autoantibodyinhealthyhumanserum DUANJin—hai， XUSha—well， MO Jian—wei， FANGYun—yong． GuangdongAcademyofMedicalSciences．EastDepartmentofNeurology， GuangdongGeneral Hosptia1．GuangdongInstituteofGeriatrics．GuangdongInstituteofNeurosciences，Guanzhou510080，China A【bstract】 Objective Topurifyandidentifytheanti—a3[42autoantibodyinnormalhumanserum．Methods Thenormal human serum wascollectedtodeterminetheconcentrationoftheantibody． Theseillm wasprecipitatedwith saturatedammonium sulfatetogetcrudeseialm IgG．TheIgGwasfurtherisolatedandpurifiedbyaffinitychromatographyonAt342 immuno—affinity column． ThenPAGE andWesternblotwasappliedtodeterminethepurityandimmune—activityofIgG． Results TheSephrose 4BaffinitycolumnactivatedwithCNBrcanproduceahighlypurifiedanti—AB42autoantibodyandthepurityrateishighupto 90％．Conclusion TheSephrose4BaffinitycolumnactivatedwithCNBrcaneffectivelyproduceahighlypurifiedanti—At342 autoantibody from human seurm． Itwillfacilitate furtherstudy on autoantibody and provide moreinofrmation forimmunization treatmentofAD． K【eywords】 Alzheimerdisease； Amyloid—betaprotein(a3[)； Autoantibody； Purification 老年性痴呆 (Alzheimerdisease，AD)是以进行 目前用含抗 AI3自身抗体的静脉用免疫球蛋 白治 性痴呆为特征的大脑退行性变性疾病 ，最终将导 疗 AD可以改善患者的认知功能 。但是这些 自身 致患者生活不能 自理。主要的病理改变