风湿性心脏病慢性心房颤动患者的心房肌钙离子通道组成蛋白α1c的变化.pdfVIP

维普资讯 · 36 · 中华心律失常学杂志2007年2月第 11卷第 1期 ChinJCardiacArrhyth。2007，Vo1．11No．1 · 心 房 颤 动 - 风湿性心脏病慢性心房颤动患者的心房肌钙离子通道组成 蛋 白Ot。的变化 ProteinandmRNA levelsofthepore-[ormlnEe~-subunitinpatientswith chronicatrialfibrillation associatedwith rheumaticvalvedisease 黄鑫 李莉 徐志云 赵峰 心房颤动(房颤)是临床上最常见的心律失常之一，房 差异，每个条带均同时检测GAPDH的表达量，并以GAPDH 颤的确切发病机制尚不完全清楚 ，治疗的总体效果较差。房 作为内参照，各条带 。的相对表达量 以 。密度单位／GAP- 颤的电生理特征是心房肌有效不应期明显缩短，目前普遍认 DH密度单位表示。 为L型钙通道电流 (， )密度的下降是心房肌动作电位时 实 费老定■PCR 反应 在 Genbank中查出人 。和 B— 限和有效不应期缩短的主要原因，但是导致房颤时心房肌细 actin的已知基因序列，分别设计和合成其扩增引物(上海基 胞 ， ．密度下降的具体机制仍不十分清楚。本研究的目的 康公司合成)。将经割胶纯化的Ot。和B-actincDNA模板用 在于明确 ， 密度下降是否缘于钙离子通道形成亚单位 。 TE液稀释成 l0一、l0一、l0～、l0一、l0～、l0“的标准品，与 蛋白含量和mRNA表达的变化，同时进一步探讨房颤时左 、 待测样本 的cDNA模板共同进行扩增，分别制作出CaM和 右心房之间的电生理差异是否缘于 。表达的不同。 B．actin的标准曲线。从总 RNA反转录得到的各待测样品 资料和方法 cDNA的模板中取5 ，加人20 反应体系中进行 PCR扩 研究对象初分组 选择2005年3月至 l2月第二军医大学 增。PCR反应过程中搜集扩增数据 ，绘制动力学曲线 ，测定 长海医院胸心外科风湿性心脏瓣膜疾病患者 35例 ，所有患 各样品的ct值(Ct值是指每个反应管内的荧光信号到达设 者均行瓣膜置换术 ，术中体外循环开始后立即取左 、右心耳 定阈值时所经历的循环数，一般取 PCR反应前 l5个循环的 组织 100～200mg，生理盐水冲洗后 ，迅速放置液氮中保存。 荧光信号作为荧光本底信号，荧光阈值的缺省设置是3～l5 其中男性 l9例，女性 l6例，年龄29～58(44．1±9．2)岁，心 个循环的荧光信号的标准偏差的1O倍，研究表明，每个模板 功能 Ⅱ～Ⅲ级(NYHA分级)。所有房颤患者的房颤持续时 的ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始 间均大于6个月，按照有无慢性房颤以及标本取材部位分为 拷贝数越多，ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可 如下4组 ，窦性心律右心房组 ，l8例，其中6例同时取左心房 做出标准曲线。因此，只要获得未知样品的ct值就可以从 组织为窦性心律左心房组 ；持续性房颤右心房组 l7例，其中 7例同时取左心房组织为持续性房颤左心房组。术