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链格孢菌对白车轴草抗旱性的影响 汪 敏，杨 艳，李 影，刘雪云，刘登义 安徽师范大学安徽省重要生物资源保护与利用研究重点实验室，安徽 芜湖 241000 摘要：在盆栽自然水分干旱胁迫条件下，研究了接种链格孢菌（Alternaria tenuis Nees）对白车轴草（Trifolium repens L.）抗旱性相关的生理生化指标的影响，结果表明：接种组与对照组叶片的电导率（EC）、丙二醛（MDA）含量、脯氨酸（Pro）含量均与干旱处理时间呈显著正相关，而叶片相对含水量（RWC）、抗坏血酸（ASA）含量与处理时间呈显著负相关。链格孢菌的侵染能促进干旱胁迫下白车轴草叶片EC和MDA含量的增加，延缓Pro的积累，加速叶片RWC和ASA含量的降低。到达干旱处理的第6天，接种组的EC、MDA含量分别比对照高20.06%、68.79%（p0.05），而RWC、Pro含量和ASA含量分别比对照低7.03%、25.3%、77.43%（p0.05）。此外，接种组超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性均于处理的第4天开始显著低于对照；过氧化氢酶（CAT）活性也于处理的第6天下降并显著低于对照，为对照的79.79%（p0.01）。表明链格孢菌会降低干旱胁迫下白车轴草的渗透调节能力和保护酶的活性，加剧活性氧的积累和膜脂过氧化程度，使白车轴草的抗旱性降低。 关键词: 白车轴草；链格孢菌；干旱胁迫；抗旱性 中图分类号：S432；Q945 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2007）05-1460-06白车轴草（Trifolium repens L.）是豆科（leguminosae）车轴草属的一种常见的多年生草本植物，在世界上分布很广，是世界上最重要的牧草之一[1]，同时也是优质的城市绿化草坪用草。链格孢菌（Alternaria tenuis Nees）是白车轴草（Trifolium repens L.）的一种常见强寄生性病原真菌，长期以来在自然种群中与白车轴草有稳定的相互作用，发病时叶片上产生白色小圆斑，叶片正、反面可见黑色分生孢子，以背面居多，严重时叶片蜷缩干枯死亡。植物病原菌侵入植物体后可引起寄主植物体内发生复杂的生理生化变化，常使寄主植物的光合速率下降，呼吸上升，膜脂过氧化加强，防御酶体系发生相应变化，许多植物病理学家由此开始探讨病原菌的致病机制和寄主植物的抗病机制[8]。其中许多与植物抗病性有关的酶，如SOD、POD、CAT等是许多学者研究的热点[1-4]。干旱是影响牧草分布及产量的重要因素之一，已成为限制白车轴草大面积扩展的主要原因[5]。国内外学者在白车轴草的抗旱性研究和水分管理方面做了大量的工作[5]，但这些工作多局限于单纯的干旱胁迫对白车轴草影响。野外调查发现，干旱时侵染链格孢菌的白车轴草萎蔫速度大于健康的白车轴草。受链格孢菌侵染后，白车轴草受到干旱胁迫时的生理生化特性变化规律少见报道。本文测定了接种链格孢菌后白车轴草在自然干旱条件下叶片的膜透性、MDA含量、PRO含量、ASA含量和保护酶活性，进而探讨链格孢菌对白车轴草耐旱性的影响，为研究逆境条件下寄主对病原菌的防病战略、抗性机制提供依据，同时也为深入开展白车轴草的抗旱性研究提供一定的理论参考。 1　材料与方法 1.1　供试材料 1.1.1　供试植物 　 白车轴草（T. repens）采于安徽芜湖神山，在同一易感性繁殖系内选取植株高度，生物量大致相同的健康非感病的白车轴草幼苗于花房稳苗。 1.1.2　供试菌种 　 链格孢菌（Alternaria tenuis Nees），为在上述易感型繁殖系内采集的白车轴草病叶的病斑上分离纯化而得。 1.1.3 供试土壤 以安徽师范大学后山田园土为供试土样，土壤性质分别为：pH 7.26，有机质13. 6 g·kg – 1， 总氮0. 506 g·kg – 1，总磷3. 26 g·kg – 1，总钾3. 45 g·kg - 1，电导率134. 67 μs·cm- 1，田间持水量28.9%。自然风干待用。 1.2　实验设计 于2006年5月在花房内进行移栽实验，共10盆，每盆装土2 kg，剪取上述白车轴草长3 cm具3叶3腋芽的匍匐茎栽入，每盆10株。正常水分培养30 d后用于接种：将链格孢菌的分生孢子悬浮液以叶片针刺法接种到上述白车轴草（3叶期）叶片上，以接种无菌水作对照,每处理设5盆重复。接种后分别隔离并正常浇水培养8 d后，停止水份供应，进行自然水份干旱胁迫（落雨时移入室内）。各处理于干旱胁迫前（0 d）、干旱胁迫期间（2 d、4 d 、6 d ）选取生长基本一致的接种叶取样测定有关生理生化指标（每天于同一时间取样）。 1.3　指标测试和方法 叶片相对含水量（RWC）采用饱和