抗原修复技术与卵巢癌肿瘤标志物免疫组化染色结果分析.pdfVIP

2011年7月第49卷第19期 ·技术与方法 · 抗原修复技术与卵巢癌肿瘤标志物免疫组化染色结果分析 李剑钢 陈明涛 (浙江省中医院病理科，浙江杭州310006) [摘要 】目的 了解抗原修复对免疫组化染色结果的影响，分析抗原修复后免疫组化染色P53蛋 白和cA一125阳性率的关 系。方法 卵巢癌标本 93例，其中浆液性腺癌47例，黏液性腺癌 39例。子宫内膜样癌 5例，未分化癌2例 ，采用高温高 压法进行抗原修复，免疫组化 Envision法染色检测P53蛋白和 CA一125的表达。结果 抗原修复后切片背景干净，显色对 比鲜明，结构清晰，定位准确，易于观察，P53蛋白阳性率 (66．7％ 比48．4％)和CA一125阳性率(58．1％比40．O％)均高于 未修复组，有显著性差异(PO．05)。 结论抗原修复技术对提高卵巢癌免疫组化染色质量有一定提高。 [关键词 】卵巢癌；免疫组织化学；抗原修复 ；病理诊断 【中图分类号 】R737．31 【文献标识码 】B [文章编号 】1673—9701(2011)19—93一O2 卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤 ，卵巢癌病死率居妇科 剂盒购 自北京中杉金桥生物技术有限公 司，按其使用说明书操 恶性肿瘤之首。随着免疫组化技术在肿瘤病理诊断 中的不断 作。用 已知P53阳性的鼻咽癌切片作为 阳性对照，用 PBS代 深入和广泛应用 ，卵巢肿瘤特异性抗原或者基因的检测 日趋 替一抗作阴性对照。组 1石蜡切片脱蜡至水。组2切片 自然 成熟，对卵巢肿瘤的病理分型和预后的判断越来越有意义 llI。 冷却后，3％H，O，室温孵育5—10min，以消除内源性过氧化物 但是由于组织定会引起蛋 白内和蛋白间的亚甲基桥的桥连，引 酶的活性；蒸馏水冲洗 2次，PBS浸泡3次，每次2rain；滴加 起许多抗原决定簇被封闭，影响了免疫组化的结果。本研究通 一 抗工作液，37℃孵育 2h或4℃过夜 ；PBS冲洗3次，每次2 过高温高压处理法进行抗原修复、免疫组化技术检测卵巢上皮 min；滴加适当量的二抗，37℃孵育 0．5h；PBS冲洗3次，每次 肿瘤组织中P53蛋白、CA一125，现报道如下。 2rain；DAB显色；自来水充分冲洗，复染，脱水 ，透明，封片。 1．5 阳性结果 1 资料与方法 判断标准P53蛋 白阳性细胞核内有棕色颗粒状物质、CA一 125阳性细胞膜染成棕黄色为阳性。根据阳性细胞所 占比例分 1．1 标本来源 为4级：0％为阴性 (一)，1％ ～10％为弱阳性 (+)，11％ ～50％ 卵巢癌标本93例，均来 自我院2006年 1月一2010年 l2 为中等阳性(++)，50％为强阳性(+++)。 月住院的卵巢肿瘤患者，年龄 18～74岁，平均52．3岁。术前 1．6 统计学处理 无放疗及化疗史 ，经术后病理证实为上皮性卵巢癌。其中浆液 两组率 的比较采用卡方检验，以P0．05为有统计学 性腺癌47例，黏液性腺癌 39例。子宫内膜样癌 5例 ，未分化 意义。 癌2例。 1．2 组织来源 所有组织来源于我院病理科 ，经术后病理证实为卵巢上皮 2 结果 性恶性肿瘤。标本 固定于中性福尔马林中，4℃下24h常规梯 抗原修复后切片背景干净 ，显色对比鲜明，结构清晰，定位 度乙醇脱