siRNA沉默Smad3对肝星状细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究.pdfVIP

· l376· 中国病理生理杂志 Chines ofP! Y ! i12；Z鱼二 墨 [文章编号] 1000—4718(2011)07—1376—06 siRNA沉默 Smad3对肝星状细胞增殖与 凋亡的影响及其机制研究 刘晓兵 一， 郭晓红 一， 刘立新 ， 张骞骞 ， (山西医科大学 第一医院科研实验中心 2肝病研究所 ，山西 太原030001) [摘 要] 目的：观察Smad3小干扰RNA(siRNA—Smad3)沉默肝星状细胞 (HSCs)Smad3基因对肝星状细 胞增殖、凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：肝星状细胞株HSCs—T6分为3组：空白对照组 、阴性对照组 、siR— NA—Smad3转染组。siRNA—Smad3转染HSCs细胞株，转染不同时间后 ，CCK一8检测 HSCs增殖的变化，流式细 胞术检测HSCs凋亡的变化，免疫细胞化学法检测HSCs凋亡相关蛋白P53和Bcl一2表达的变化。结果：(1)24h、 48h、72hsiRNA—Smad3转染组 HSCs增殖受到显著抑制且凋亡明显增多(P0．01)。(2)转染48h后，siRNA— Smad3转染组P53蛋白表达显著增多 ，Bcl一2蛋白表达显著减少(P0．01)。结论 ：siRNA—Smad3沉默Smad3基 因可以在一定时间内显著抑制 HSCs的增殖并诱导其凋亡，其可能通过上调凋亡相关蛋白P53表达、下调 Bcl一2 的表达来发挥诱导凋亡的作用 ；Smad3沉默有望成为抗肝纤维化治疗的一个新途径。 [关键词] RNA干扰；Smad3；肝星状细胞 ；肝硬化 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．07．023 EffectofsiRNA ——mediatedSmad3 silenceonproliferationandapoptosis inactivatedhepaticstellatecells LIUXiao～bing，，GUOXiao—hong，，LIULi—xin，，ZHANGQian—qian (ExperimentalCenterofScienceandResearch，TheFirstHospital，InstituteofHepatopathy，ShanxiMedicalUniversity， Taiyuan030001，China．E—mail：lixinliu6@hotmail．com) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofsiRNA—mediatedSmad3silenceonproliferationandapoptosis inactivatedhepaticstellatecells(HSCs)．METHODS：HSCs—T6cellsweredividedinto3groups：blankgroup．nega- tivecontrolrgoupandsiRNA —Smad3transfectionrgoup．ThesiRNA —Smad3wastransfectedintoHSCs—T6cells．At differenttimepointsaftertransfection，cellproliferationwasmeasuredbyCCK一8，cellapoptosisWaSdetectedbyflow cy- tometry，andproteinlevelsofP53andBcl一2weredeterminedbyimmunocytochemistry．RESULTS：HSCsproliferation wassignificantlyinhibitedatthetimepointsof24h，48hand72haftertrnasfeetion．Meanwhile theapoptosisofHSCs