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·482 · 中国危重病急救医学2011年8月第23卷第 8期 Chi rit 望 !垒g ! !y ． ! ·
· 论 著 ·
脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞表达
血管性血友病因子裂解酶的研究
郑责军 殷冬梅 武子霞 孙茜 朱海云 李银平
【摘要】 目的 从剂量一效应和时间一效应关系探讨脂多糖 (LPS)对大 鼠主动脉 内皮细胞 (RAECs)血管
性血友病因子裂解酶(ADAMTS一13)mRNA和蛋 白表达的影响。方法 采用组织贴块法培养Wistar大 鼠的
RAECs，1周后按 1：3传代至第 4～5代 ，将细胞分为空 白对照组和 0．01、0．1、1、5t*g／mlLPS刺激组，分别
于 12、24、48、72h用半定量逆转录一聚合酶链反应 (RT—PCR)测定 内皮细胞 ADAMTS一13mRNA表达 ；用酶
联免疫吸附法 (ELIsA)检测上清液 内ADAMTS一13蛋 白水平 。结果 空 白对照组有一定量的ADAMTS～13
mRNA和蛋 白表达 。随着 LPS刺激浓度增加和刺激时间延长 ，ADAMTS一13mRNA和蛋 白表达逐渐下降。与
空 白对照组(Z5．22士1．41)比较，0．01gg／mlLPS刺激 48h时ADAMTS一13mRNA表达 (18．78±0．86)即明
显下降 (尸0．01)；0．1／zg／ml和 1／zg／mlLPS刺激 24h时ADAMTS一13mRNA表达(23．43±0．63、22．41±
0．76)即明显下降(P0．05和P0．01)；5~／g／mlLPS刺激 12h时ADAMTS一13mRNA表达 (20．01土
2．47)即明显下降 (P0．01)。与空 白对照组~(115．76±2．36)ng／m1]比较 ，0．01~／g／mlLPS刺激 12h时
ADAMTS一13蛋 白表达 [(113．43士1．07)ng／ml3即明显下 降(P0．05)；至 5btg／mlLPS刺激 72h时
ADAMTS一13蛋 白表达 [(7．63士2．64)ng／m1]降至最低 (P0．01)。结论 RAECs有一定量 的ADAMTS一13
mRNA和蛋 白表达；不同浓度 LPS刺激 内皮细胞不同时间后ADAMTS一13mRNA和蛋 白表达降低，具有剂
量依赖性和时间依赖性。
【关键词】 脂多糖 ； 主动脉 内皮细胞； 血管性血友病因子裂解酶； 大 鼠
Induction of expression of yon W iliebrand factor cleaving protease of rat aortic endothelialceil by
lipopolysaccharidechallenge ZHENG Gui一皿 ，Y N Dong—mei，WU Zi—xia，SUN Oian，ZHU H —
yun，u Yin—ping． Departmentof ]ntentiveCareUnit，Zhuozhou C赴 HospitalofHebeiProvince，
Zhuozhou 072750，H ebei，China
Corresponding author：L Yin—ping，Tianjin TianheHospital，Tianjin 300050，China，Email：cccm． yahoo．com．cn
[Abstract] Objective Toinvestigatethedose——responseeffectandtime—-responseeffectoflipopolysac——
charide (LPS)onyonW illebrandfactorcleavingprotease (ADAMTS一13，vWF—cp)mRNA expressionand
proteininrataorticendothelialcells (RAECs)．Methods RAECsweregrownbyculturingofaortictissue．
WhenARECswereculturedforoneweek，itwasco—culturedby 1：3toreach4 5generations．ARECs
wererandomlydivided intofivegroups：controlgroup and fourLPSstimulationgroups (0．01，0．1，1
and5g／m1)．TheRAECsand supernatantswereobta
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