枸杞对大鼠肝再生的影响.pdfVIP

第 36卷 第 6期 河南师范大学学报(自然科学版) V ．36 N 0．6 20O8年 11月 J0r口Zo，H n N0，．，口ZU托 rs￡ (N口 ，口‘ZSc已c) N 0口．2OO8 文章编号 ：1OOO一2367(2008)O6一O105～03 枸杞对大 鼠肝再生的影响 张文学，荣换玲 ，卢 正，苗艳艳，刘文玲，徐存拴 (河南师范大学 生命科学学院，河南 新乡 453DO7) 摘 要 ：以肝／体重比和核仁组成区相关嗜银蛋白(AgN0Rs)颗粒数为指标，研究了枸杞水煎剂对大鼠2／3肝切 除后肝再生 的影响．结果表明：肝切除后第 3d实验组大 鼠的肝 ／体重 比大于对照组，但无显著性差异，第 4d实验组 大 鼠的肝 ／体重 比显著大于对照组 (PO．O5)；第 3d和第 4d实验组大 鼠的肝细胞 AgN0Rs颗粒数显著大于对照组 (PO．O5)．初步证实枸杞水煎剂对肝切除后的大 鼠肝细胞分裂增殖有促进作用． 关键词 ：枸杞子；大鼠；肝再生；核仁组成区相关嗜银蛋白；2／3肝切除 中图分类号 ：Q71 文献标识码 ：A 枸杞 (L c“ 6nr r“mL)也叫枸杞果 ，产于宁夏 、河北 、河南 、山西等地 ，是一味常用的中药．历史文献 记载枸杞性平 、味甘，可滋补肝肾、益精 明目．近年研究表 明枸杞具有抗衰老 、降血脂、保肝 、降血糖及提高机 体免疫等功能 卜引．关于枸杞的保肝功能的研究 ，已发现其对化学性肝损伤有保护作用 卜 ．枸杞能否促进 肝细胞 的分裂增殖?对肝再生有何影响?未见文献报道．本文 以SD大鼠为材料，以肝 ／体重 比和核仁组成 区相关嗜银蛋 白(AgNORs)为指标，探讨了枸杞对肝大部切除(PH)后肝再生的影响． 1 材料和方法 1．1 药 物 枸杞购于新乡市医药公司，于锅 内加水煮沸 ，其水煎剂终浓度为 1g·mL_。． 1．2 实验动物的分组及处理 SD纯系大鼠40只，由河南师范大学实验动物 中心提供 ，雌雄不限，体重 2O0g左右．按 Higgins等方法 进行大 鼠2／3肝切除(PH)，即切除大 鼠肝脏 的左外叶和左中叶[6]．手术后将大鼠随机分对照组和实验组，每 组 1O只大鼠．对照组大 鼠于手术后及每隔 12h用 自来水灌 胃，而实验组大 鼠于手术后及每隔 l2h用枸杞 水煎剂灌 胃，灌 胃量 4g·kg_。．分别在手术后的 3d和 4d解剖观察并取材． 1．3 肝 ／体重比的计算 在各时间点取材前称大 鼠的体重 ，取材时称肝脏的重量 ，然后算出各时间点大 鼠的肝重与体重之比．数 据以 ±s表示．采用单 因素方差分析 (ANOVA)及 q检验对数据进行统计学分析． 1．4 取材及制备石蜡切片 颈椎脱 臼处死大 鼠，打开腹腔，切取方叶投入 PBS缓冲液中洗去血液，按照常规方法制备石蜡切片． 1．5 AgNORs的显示和统计分析 切片脱蜡复水后入酸化液 (36 冰乙酸 ：无水酒精一1：3)酸化 6min；蒸馏水冲洗 3～4次人新鲜配制 的胶银工作液 (2g明胶加入 1 甲酸中配成 2 的溶液 ，临用前与 50 的硝酸银溶液 1：2混合)室温避光 染色 40min；冲洗后人 5 硫代硫酸钠水溶液脱色 2min；蒸馏水冲洗后常规脱水 、透明、封片． 4O倍镜下统计细胞核内AgNORs数 目．随机选取数个肝小叶，从 中央静脉到 门管区连续选择视野进行 统计．各时期的材料都统计 6O0个细胞核 ，并以 “颗粒数 ／细胞核”表示．采用单因素方差分析 (ANOVA)及 q 收稿 日期 ：2())(7一O9—1O；修 回日期 ：2()(]8一O6—1O 基金项 目：国家 自然科学基金(3O27O673) 作者简介 ：张文学 (1957一)，男，河南安阳人 ，河南师范大学教授 ，主要从事动物发育与免疫研究 1O6 河南师范大学学报 (自然科学版) 检验对数据进行统计学分析． 2 结 果 2．1 肝 ／体重比的比较 肝切除后不同时期的肝 ／体重比见表 1，可见 表 1 各时间点肝 ／体重比及其差异性 比较 PH后