羟胺三氯化铁法测定几种动物正常全血胆碱酯酶活性.pdfVIP

ChineseJ0urnal0fVeterinaryMedicine 中国兽医杂志 2oo8年 (第 44卷)第 12期 91 羟胺三氯化铁法测定几种动物正常全血胆碱酯酶活性 叶嘉明，潘家强，唐兆新，郭剑英，李 英 (华南农业大学兽医学院，广 东 广州 s1O642) 中图分类号：s852．23 文献标识码 ：B 文章编号：O529—6。05(20。8)12一O。91一O2 有机磷和氨基 甲酸酯类农药是我国生产和应用 化场，常规养至 42～49日龄进行采样；羊购 自广东 最广泛 的农药品种 ，其 中某些药物也常用做动物体 增城某羊场 ，经临床检查确认健康后采样 ；犬从广州 内和体外杀寄生虫药 。在兽 医临床上 ，因意外事故 郊区农村收购 ，经临床检查确认健康后采样；牛血液 和用药不当所致 的中毒事件 时有发生 ，其致毒机理 样品采集 自广东英德某牛场 。所采样品均为全血 ， 是与体 内胆碱酯酶 (ChE)结合 ，形成性质稳定 的磷 肝素抗凝 。见表 1。 酰化胆碱酯酶，使胆碱酯酶失去活性 ，从而造成 乙酰 表 1 试验动物概况 胆碱在体内集 聚，引起一系列I临床症状甚至死亡 。 血液 ChE活性测定是早期发现和诊断有机磷农药 中毒的重要指标之一l】]。因此，研究动物体 内胆碱 酯酶的活性 ，对有机磷农药和氨基 甲酸酯类农药 中 毒的及时诊断和科学用药均具有重要意义。在人类 医学 ，目前 国内外已建立 了多种测定 ChE活性的方 1．2 试剂 所用试剂均为分析纯试剂 ，按照 WS／T 法，如硫代乙酰胆碱一联硫代双硝基苯甲酸法 (Ell— 66 1996所规定的方法配制 ]。 man法)、羟胺三氯化铁法 、酸度计法 、纸片法等。 1．3 主要仪器 UV一754分光光度计 ，比色管，普 然而在兽医学领域 ，目前 尚没有 ChE活性测定 的统 通漏斗 ，恒温水浴箱，血色素吸管等。 一 标准。本研究参考卫生部全血胆碱酯酶活性测定 1．4 测定方法 按照全血胆碱酯酶活性分光光度 标准 (WS／T66—1996)_2]，测定 4种常见动物正常 测定方法一羟胺三氯化铁法 (WS／T66— 1996)所规 全血胆碱酯酶的活性，以期对动物有机磷和氨基 甲 定的步骤测定 口]。 酸酯类农药中毒的临床诊断和治疗提供参考 。 1．5 乙酰胆碱标准 曲线绘制 于 1O支试管中分别 1 材料与方法 加入 0．1，0．2，0．3，O．4，O．5，0．6，0．7，O．8，O．9，1mL 1．1 实验动物及样 品采集 鸡购 自广东深圳某孵 乙酰胆碱标准应用液，乙酰胆碱含量分别为O．7， 1．4，2．1，2．8，3．5，4．2，4．9，5．6，6．3，7．0 moI，各 收稿 日期 ：2007一O7—23 管加 pH7．2磷酸盐缓冲液至 2mL，置 37℃水浴中 基金项 目：华南农 业大学校长基金项 目 作者简介 ：叶嘉 明(19