油菜小孢子高效培养体系构建I．影响小孢子成胚的若干因素研究.pdfVIP

792 江苏农业学报 (JiangsuJ．ofAgr．Sci．)，2008，24(6)：792～796 油菜小孢子高效培养体系构建 I．影响小孢子成胚的 若干因素研究 龙卫华， 浦惠明， 戚存扣， 张洁夫， 陈 松， 陈新军， 高建芹， 陈 锋， 胡茂龙 (江苏省农业科学院经济作物研究所，江苏 南京 210014) 摘要： 通过对不同田间温度下的油菜花蕾大小、冷处理时问、更换培养液和培养密度等影响因素试验，建立 并优化了长江下游生态型甘蓝型油菜高效小孢子培养体系。结果表明，适宜的花蕾大小与田间温度有密切关系， 随着温度升高，应适当降低选取花蕾的长度；冷处理对特定的基因型材料的出胚有效 ，总体影响不大；在高浓度蔗 糖的NLN液体培养基培养2d后换NLN13培养液后可使材料的出胚数升高；培养密度以 1ml培养液含0．5个花 蕾最为合适。 关键词： 油菜 ；小孢子培养；小孢子成胚；体系构建 中图分类号： Q813．1 1 文献标识码： A 文章编号：2008)06—0792—05 HighEfficiencyM icrosporeCultureSystem Construction ofBrassicaNa— pus I．FactorsInvolvedinMicrosporeEmbryogenesis LONGWei—hua， PuHui—uring， QICun—kou， ZHANGJie—fu， CHENSong， CHENXin-jan， GAOJian—qin， CHEN Feng， HU Mao—long (InstituteofIndustryCrops，JiangsuAcademyofAgriculturalSciences，Na ng210014，China) Abstract： FourinfluencingfactorswereadjustedtOyieldmoreembryos，whichwerebudlengthunderdifferenttem— perature，coldpretreatedtime，medium evolutionandculturedensity．Theresultshowedthatthecorrectbudlengthwasvery connectedwiththefieldtemperature，theshorterbudsshouldbechosenasthetemperatureraised．Thecoldpretreatment wasonlyeffectivetosomegenotypematerials，anditdidnotenhancetheembuonumber．Changingthemedium afterincu- batingwithhighconcentrationsucroseNLN liquidfor2dcouldgetmoreemb~os．Thenlostappropriatedensitywas0．5 budin 1mlNLN medium．Themicrosporeculturesystem ofBrassicanapusoftheecotypeofthelowerreachesoftheYan— gtzeRiverwasoptimizedandconstructed． Keywords： Brassicanapus；mierosporeculture；microsporeembuo；system consturction 随着现代生物技术的发展，利用常规育种与生 油菜的小孢子为外植体的组织培养技术，它在基因 物技术育种相结合培育高效型油菜新品种…已经 纯合、目标性状转移 J、永久群体 构建等方面有 成为众多育种家的共识。小孢子培养技术体系是以 着特殊 的优 势，并 可 与诱变 技术 J、转 基 因技 术 、远缘杂交 等相结合进行种质创新，甚至利 收稿 日期 ：2008~8一t8 用该技术获得的DH系 ，可