浅谈转基因食品检测技术.pdfVIP

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S I L I C O 警鬓. 翻 V A L 浅谈转基 因食 品检侧 技术 孙 科 ( 长江大学生命科学学院 湖北 荆州 434025) 摘〔 要〕迄今为止,转基因牛、羊、鱼、虾、粮食和水果在国内外均己成功并已投入食品市场。因此,转基因食品的检测技术成了重中之重。概述转基因食品 的情况,分析其检测技术特点。 关〔键词] 转基因食品 检测技术 中图分类号: TSZ 文献标识码: 几 文章编号: 167 1一7597 ( 200 8) 40 20073一0 1 转基因食品主要是指利用基因工程技术改变基因组构成,将某些外 性: 要消除转基因食品检测中假阳性结果的影响,可采用os ut he m杂交、 源基因转移到动物、植物或微生物中去,改造其遗传物质,使其性状、营 PCR产物纯化测序或PCR扩增产物酶切分析等方法 ,对样 品同时检测其 养价值或品质向人们所需 目标转变,并由这些转基因生物所生产的食品。 C砂 355和no5基因双元件,可避免某些作物因自然感染花椰菜花叶病毒或 转基因食品也称基因改造食品或基因修饰食品 (Gne te i cia y Mdo i f i de 根癌农杆菌产生的假阳性结果。 Fo od,G杯) 。近几年,随着转基因食品的快速发展,转基因食品的安全 ( 二) 实时荧光定量PRc 法 性受到广泛关注,因而对转基因食品的检测是非常必要的。 实时荧光PC R技术最早在1996年 由美国App i ed Bi osyst ems 公司推 一、转基因食晶橄述 出,是指在常规Pc R基础上添加了一条标记了两个荧光基团的探针,利用 DNA是生物体内的遗传物质; 通过DNA 的复制、转录和翻译将遗传信 荧光信号积累实时监测整个PRc 进程,最后通过标准 曲线对未知模板进行 息进行传递和表达。通过对生物体 内DNA 分子的修饰改造从而改变生物体 定量 的方法 。 的遗传性状,这是转基因技术的理论基础。DNA限制性内切酶及基因克隆 目前我们应用于实时定量PCR检测体系中的荧光探针主要有3种: 分 等技术的发现为转基因操作奠定了技术基础. 转基因技术的主要步骤: 分 子信标探针,Tqa Mna 探针和杂交双探针。实时定量PRC 检测的灵敏度至少 离 目的DNA片断,将 目的片断克隆到细菌的DNA中,构建重组DNA ,将重组 是竞争PCR的10倍,它可以检测到每克样品中含ZPg转基因的ND A量。对加 ND A扩增后,利用农杆菌介导、基因枪、化学物质诱导、电穿孔、微注射 工、未加工和混合样品都可以进行检测. 实时荧光PRc 技术有效地解决了 及花粉管通道等方法将连接了启动子和终止子的目的基因导入到 目标植物 传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的 的细胞中,最后筛选含 目的基因的转化细胞,并诱导产生转基因植株,经 强度,并记录在电脑软件之中,可对整个Pc R进程的实时监测. 此外,实 扩繁后,加工生产 出转基因食品。 时荧光PC R采用 闭管分析,无需电泳等PRC 后处理步骤,能有效消除核酸的 随着转基因食品的发展,转基因食品亦是一把双刃剑,带给我们利 交叉污染。由于在PCR反应体

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