新铂类药物双环铂对8种结肠癌耐药细胞的化疗敏感性分析.pdfVIP

重庆 医学 2011年 10月第 4O卷第 28期 2865 · 经验交流 · 新铂类药物双环铂对 8种结肠癌耐药细胞的化疗敏感性分析 魏 雯，刘 桢 ，陈 曦，李楠静 ，李立兰，毕 锋△ (四川大学华西医院肿瘤中心腹部肿瘤科 ，成都 610041) 摘 要 ：目的 用双环铂对 8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞及其原代细胞作化疗敏感性研 究 ，为扩大该新药的临 床应用范围，给耐药结肠癌 患者提供更 多化疗选择奠定基础 。方法 将 8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞 系及其原代 细胞 系 COI0320与 COLO320／OHP，COI0320与 COlO32O／CPT，SW620与 SW620／OHP，SW620与 SW620／CPT，SW480与 sw48O／()HP，SW480与 Sw48O／CPT，IOVO与 I()V()／()HP，IOVO与 IOVO／CPT配对培养于96孔板 。按从低到高的浓度加 入双环铂作用一段时间后做 3一(4，5二 甲基噻唑 2)2，5二苯基四氮唑溴盐(MTT)细胞毒性试验 ，计算各原代及耐药细胞的 Ic。、 耐药指数及 临床用药浓度下对各耐药细胞的抑制率 ，分析双环铂对上述耐药细胞的疗效 。结果 8种结肠癌耐药细胞对双环铂 的耐药指数均为 1．1o～2．46，而各细胞 系原有耐药指数在 l0．16～25．87，且双环铂对 8种 中的7种耐药细胞均敏感 ，对其 中 1种 细胞系具有高度化疗敏感性 ，3种 中度敏感 ，3种低度敏感 ，1种不敏感 。结论 多数耐奥沙利铂 ／伊立替康的结肠癌耐药细胞 (7／ 8)对双环铂具有不完全交叉耐药性，可 以考虑将其作为临床耐药结肠癌患者的另一化疗选择 。 关键词 ：抗肿瘤联合化 疗方案 ；抗 药性 ，肿瘤 ；结肠肿瘤 doi：l0．3969／j．issn．167l一8348．20l1．28．022 文献标识码 ：B 文章编号 ：l6718348(20l1)282865—03 双环铂是 由北京兴大科学系统公司开发 的新型铂类化合 用胰酶消化 ，离心后弃上清液 ，重悬为单细胞悬液 ，在细胞计数 物，是我国具有完全 自主知识产权的化学 I类抗癌新药 ，体外 板上计数 ，得到细胞悬液浓度 ，稀释至 8000～ 10000个 ／mI， 研究和 I期l临床试验显示双环铂具有低毒、高效的抗肿瘤活 接种于 96孔板上 ，每孔加 100ffI细胞悬液 即 800～1000个 性，是前景较好的新一代铂类抗癌药物 ]。本试验选用双环 细胞 。 铂作用于 8种耐奥沙利铂或伊立替康 的结肠癌耐药细胞系及 1．3．3 加药培养 事先将双环铂用纯水配置成从高到低 的 9 其原代细胞 ，旨在测试双环铂对奥沙利铂或伊立替康有无交叉 个浓度 ：l000、500、250、100、50、l0、5、1、0．5ffg／mI，在 96孔 耐药性，及双环铂对耐药结肠癌细胞 的化疗敏感性 。为推广双 板接种完成 24h后 ，再经新鲜培养基稀释 1o倍使混合液 中药 环铂 的临床应用 ，为耐药患者提供更多的化疗选择奠定基础 。 物终浓度为 100、50、25、10、5、1、0．5、0．1、0．05 g／mI，取一个 l 材料 与方法 上述接种好 CO10320与 COI()32O ()HP细胞 的 96孔板 ，按 1．1 材料 选取 由四川大学华西临床医学院信号转导实验室 浓度从低到高 的顺序加入__卜述含药培养基 ，每孑L100 I。加 提供 的8种结肠癌原代细胞及其耐药细胞共配对成 8组 (耐奥 药后作用 24h再次更换新鲜培养基继续培养 ，细胞在不 同的 沙利铂和耐伊立替康各 4组)，所有耐药细胞系均 由本实验室研 浓度药物作用之下 出现生长差异 ，定期观察细胞的生长状况 ， 究人员用浓度梯度递增法诱导建立 ，经反复测试证 明其耐药十牛 并于更换培养基后 48h后做 MTT细胞毒性试验 ，将仅有细