1, 2, 4-三氯苯对斑马鱼体内SOD, CAT 和AKP 活性影响.docVIP

1,2,4-三氯苯对斑马鱼体内SOD、CAT和AKP活性影响 Effects of 1,2,4-trichlorobenzene on the activities of SOD, CAT, AKP in zebrafish ，*，(1广东工业大学环境科学与工程学院，，；*联系人，E-mail：LIU Wuxiang, DU Qingping*，LI Yanxu，WEI Dongyang (1 Faculty of Environmental Science and Engineering, Gangdong University of Technology, Guangzhou 510006; 2 South China Institute of Environment Sciences, SEPA, Guangzhou 510655；E-mail：qpdu2008@126.com引言 1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB )是一种氯代芳香烃类化合物，主要用作印染载体、电解液、润滑剂、 导热剂等的生产原料和中间体，后来在电化学工业中用作多氯联苯的代用物曾大量投入使用。美国 环境保护局已将1,2,4-三氯苯确定为重要的环境污染物清单。许多国家已经禁止使用或者限制使用三氯苯产品。因此近十年国外大量的三氯苯产品销往我国和一些不发达国家。1,2,4-三氯苯（1,2,4-TCB）是典型持久性有机污染物之一，具有高脂溶性，不易降解，造成水体中1,2,4-TCB污染相当严重。本文以斑马鱼（zebrafish），观察1,2,4-TCB成年斑马鱼体内SOD）、CAT）及AKP）活性，进而探讨1,2,4-TCB毒性作用及机制材料与方法 2.11,2,4-trichlorobenzene）（纯度99%）购自Alfa Aesar A Johnson Matthey 公司；丙酮（分析纯）用作助溶剂。1,2,4-TCB用丙酮助溶后，用双蒸水配制成1000 mg?L-1储备液备用。其它试剂均为进口或国产分析纯。 2.2 试验鱼分组染毒及组织匀浆制备 健康斑马鱼125条，随机分成5组（0，2，4，8，16 mg?L-1），染毒后第2，4，6，8，10 d分别取斑马鱼5尾，用双蒸水清洗3次，用滤纸吸干表面水分后称重，加入4℃ PBS缓冲液（体重g：体积mL=1:10）冰浴中高速匀浆，在4℃、10000r/min离心25min，取上清液测定。 2.3 测定指标和方法 蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝法；SOD活性测定采用改进的邻苯三酚法；过氧化氢酶（CAT）测定紫外分光光度的测定；碱性磷酸酶（AKP）采用对硝基磷酸苯二钠测定3．结果与讨论表1 1,2,4-TCB对斑马鱼体内SOD活性影响 U/gprot 对照组 浓度（mg/L） 2 4 8 16 2 0.91±0.36 1.15±0.20 1.29±0.27 1.87±0.13 0.93±0.32 4 1.05±0.53 1.77±0.72 1.95±0.92 2.29±0.59 1.50±0.64 6 1.24±0.80 2.26±0.12 2.38±0.27 2.75±0.40 1.94±0.48 8 1.10±0.52 3.24±0.58 3.54±0.30 2.53±0.64 1.45±0.72 10 1. 19±0.62 1.02±0.51 1.98±0.92 2.12±0.79 0.97±0.27 表2 1,2,4-TCB对斑马鱼体内CAT活性影响 U/gprot 对照组 浓度（mg/L） 2 4 8 16 2 8.38±1.28 9.78±2.08 10.47±1.27 9.89±2.21 9.27±0.70 4 8.69±1.20 11.07±0.60 12.10±0.42 10.98±0.89 8. 96±1.22 6 10.01±1.27 12.33±1.25 13.91±1.53 12.53±3.38 7.93±0.39 8 10.19±1.94 12.52±2.27 13.70±1.83 12.39±1.60 7.23±0.31 10 9.49±0.85 9.69±1.03 11.06±2.15 8.04±0.89 6.64±0.38 表3 1,2,4-TCB对斑马鱼体内AKP活性影响 U/gprot 时 间（d） 对照组 浓度（mg/L） 2 4 8 16 2 57.72±10.25 64.37±9.42 64.89±6.63 58.42±10.65